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lidxiu

铁虫 (小有名气)

[求助] 蛋白分离选多大的超滤管 已有2人参与

请问做过蛋白分离的亲们，我有一个13.7KD的蛋白，然后接上一条大概66个碱基的DNA，DNA大概算下来18-20KD。现欲将接上DNA的蛋白分离出来。然后弃去未接上的蛋白和DNA.。需要买哪种型号的Amicon® Ultra离心超滤管,10k还是30K? 谢谢！
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1楼 2018-12-06 13:58:45
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play0joke

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lidxiu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-12-10 14:28:26
个人认为你的思路不对。使用超滤管是达不到你的实验要求的。两个组分之间分子量差距太小，超滤过程是无法完全分离的。建议考虑下亲和层析或者分子筛。
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思维随时转动，脚步永不停息
2楼2018-12-06 16:19:43
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lidxiu

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by play0joke at 2018-12-06 16:19:43
个人认为你的思路不对。使用超滤管是达不到你的实验要求的。两个组分之间分子量差距太小，超滤过程是无法完全分离的。建议考虑下亲和层析或者分子筛。

蛋白接上DNA后，总的分子量就在30KD左右了 ，而没有接上的蛋白或者DNA 的分子量在13.7KD,或者18KD, 分子量差距10K左右，也不能分离吗？
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3楼2018-12-06 21:34:43
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广州锐科生物

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lidxiu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-12-10 14:28:37
分离效果不好的，两个分子量太接近。分子筛可能也会效果不好，建议试试离子柱
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4楼2018-12-07 11:47:49
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lidxiu

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 广州锐科生物 at 2018-12-07 11:47:49
分离效果不好的，两个分子量太接近。分子筛可能也会效果不好，建议试试离子柱

好的，谢谢
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5楼2018-12-08 17:20:56
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