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浅谈核酸染料，最佳EB替代品
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对于这个问题，实验室一直在讨论，各种核酸染料各有优缺，到底应该选择哪一个实在是个让人头疼的问题！ 因为工作需要，我们室的核酸电泳量相当巨大，每天都要不停的跑啊跑。。所以对这个EB替代品问题就比较关心，基本上市面上的所有核酸染料都买来试过了。 其实做核酸电泳 替代EB的主要原因无非两条： 1 保证对身体低危害； 2 在不影响EB的效果的前提下，可以更加稳定，敏感度更高，以适应高精确度的实验 以这两条原则为准绳，我们做到现在，只有两个产品可以达到 sybr green ,和 gelred 无论是危害性，实验效果都可以达到要求。 但是鉴于实验室已经被污染，并且这两个产品的价格要比EB高出许多，所以现在仍然在使用EB。 想立刻更换EB替代品，希望大家根据自己的经验，给些建议，师弟在此不胜感激！ 补充一个小知识，AO又称丫叮橙，剧毒致癌物质，也可以做DNA和RNA电泳。它在做双链DNA电泳时呈现绿色荧光，单链则为红色荧光。 现在有不少国内EB替代品就是用AO(丫叮橙)为原料，实验效果虽然不如EB，这个暂且放在一边不说，就是毒性也够吓人的！无是从健康角度还是实验效果而言都无法与EB媲美！ 希望大家谨慎选择，剧我所知，国内的EB替代品，核酸染料全是用AO丫叮橙调制！ 因为所有的染料我都用过，这些国内的EB替代品，它们跟AO丫叮橙的实验结果惊人的相似！大家不妨都拿来试用一下看看结果。 在毒性认证这方面我可以说我们应该很重洋媚外！ 没有人愿意拿自己5年甚至10以后的身体健康来做赌注 我们实验室刚用sybr green 替代EB，可能是刚用条件不是摸的透彻，跑出的不如EB漂亮。 请问你们使用sybr green 的步骤？ 不是要预染10MIN，染长时间有影响吗？ 实验室开空调，是否影响胶浓缩时间？ 是不如eb漂亮，有时候还不准，跑一组，条带都成锯齿了，不过比ＥＢ敏感多了，用核酸染料染的也可以用凝胶成像仪看，也可以拍， 电压越高，条带越乱，有时候会误认为是非特异性扩增，后又跑下ＥＢ，发现是目的条带，现在还没想出为什么． 不同公司的sybr现在效果差别很大！产品相当乱。 建议大家可以试试 gelred ,各方面效果都很出色，还可以免费试用的，不过不知道现在还发不发免费装 biospace wrote: 补充一个小知识，AO又称丫叮橙，剧毒致癌物质，也可以做DNA和RNA电泳。它在做双链DNA电泳时呈现绿色荧光，单链则为红色荧光。 现在有不少国内EB替代品就是用AO(丫叮橙)为原料，实验效果虽然不如EB，这个暂且放在一边不说，就是毒性也够吓人的！无是从健康角度还是实验效果而言都无法与EB媲美！ 希望大家谨慎选择，剧我所知，国内的EB替代品，核酸染料全是用AO丫叮橙调制！ 因为所有的染料我都用过，这些国内的EB替代品，它们跟AO丫叮橙的实验结果惊人的相似！大家不妨都拿来试用一下看看结果。 在毒性认证这方面我可以说我们应该很重洋媚外！ 没有人愿意拿自己5年甚至10以后的身体健康来做赌注 看来以后接触goldiew还是小心点好 Ｇｅｌｒｅｄ是哪家公司买呢？价格多少？ 天根又推出了一个叫GeneGreen的染料,说是属于花青类染料,比EB毒性低,无致癌性,灵敏度比EB高10倍.紫外发射绿色荧光.拿了个试用装.不知道是不是楼上所说的AO(丫叮橙)? gelred价格是很高啊,将近一千块了. 只要有上边所说的那个特性就应该是丫叮橙了，所以建议大家谨慎操作 gelred价格是比较高的，奢侈的实验室才用的起了，不过送我们的试用装还没用完呢 请问楼上是在哪申请的试用装？ www.probes.com.cn 很久以前的活动了，你自己找找看吧 做电泳这么多年，其实还是EB最好，没毒就完美了 强力推荐大家使用gelred，效果没的说，另外我看了报价，竟然比美金报价格还便宜，相当划算的EB替代品 记得我们实验室用过赛百盛，跑的效果还是不错的。染DNA是绿色荧光，不知道和上面说的是不是一样的东西，我只知道商品名，呵呵 我刚到实验室不久,听说是用一种叫"GENEFINDER"的EB替代品,不知道和以上大家说的有无联系,要是也有毒性的话我以后可要小心了. 我现在还是从goldiew用回EB了.没办法啊,EB灵敏度高而且便宜.安全自己多注意了,戴两层一次手套和一层橡胶手套可以了吧. 其实我觉得核酸染料最好还是不要直接接触,不管现在有毒还是没毒的. 因为从目前核酸染料的原理来讲,都是插入DNA,被刚性力束缚.当一定波长的光诱导以后,无法通过基团旋转来释放多余能量,只能通过电子的跃迁来平衡,所以发出荧光. 还是少直接接触的好. The effectie ingredient in Goldiew is acridine orange (extremely cheap from Aldrich or Sigma at ~100g/$140!) Acridine orange is a known gel stain since 1970s (“Analysis of single- and double-stranded nucleic acids on polyacrylamide and agarose gels by using glyoxal and acridine orange”. Proc Natl Acad Sci U S A. 1977 No;74(11):4835-8. Acridine orange is a highly toxic and known mutagen! Selected list of papers on acridine orange toxicity: Web, RB. Mutat Res. 1984 Jul;137(1):1-6. Wugmeister, M. Yale J Biol Med. 1983 Jan-Feb;56(1):9-13. Martin, SE. Mutat Res. 1981 Jun;82(1):41-6. Ashad, R. Letters in Applied Microbiology 2006, 42:94. goldiew ,genefinder等这些染料其实都是上边所说的 acridine orange （丫啶橙），毒性很大，如果大家现在用的是这两种东西就建议还是换回eb吧！！ 现在已经真相大白， 建议不要再为节省那点银子而做无畏的牺牲了！！ 只要有上边所说的那个特性就应该是丫叮橙了，所以建议大家谨慎操作 gelred价格是比较高的，奢侈的实验室才用的起了，不过送我们的试用装还没用完呢 请问是哪个特性啊 只要有上边所说的那个特性就应该是丫叮橙了，所以建议大家谨慎操作 gelred价格是比较高的，奢侈的实验室才用的起了，不过送我们的试用装还没用完呢 请问是哪个特性啊 这个特性: 它在做双链DNA电泳时呈现绿色荧光，单链则为红色荧光 还想关注这个问题 赛百盛公司的Goldiew核酸染料，说明书上写的是没有毒害，我们实验室一直在用，效果还是不错的。 别用Goldiew了，剧毒！！！强烈推荐gelred，如果不是价格问题就买吧，我有个导师刚从美国回来，那边做课题基本都在用gelred出的结果了，效果非常好，至于毒性，大家就擦亮双眼吧，这些尖端的东西还是重洋点好，毕竟老美在环保这方面可是比我们要重视的多的 GelRed的确比较不错。 我这里有翻译的中文说明书，感兴趣的可以看看。 GelRed核酸凝胶染色剂中文说明书（把@换成.）： http://www@mylab@com@cn/admin/UploadDriers/2007425112742365.pdf 是不是丫锭橙跑个电泳就知道了，丫锭橙染色效果不如ＥＢ的，目前比ＥＢ好的荧光染料的毒型都低得多，比如ＧＥＬＲＥＤ，ＧＥＬＧＲＥＥＮ，ＳＹＢＲ ＧＲＥＥＮ，ＧＥＮＥＳＥＡＲＣＨ， 我们实验室用的是Gelred的，还是在我的极力推荐下替换的，老板也很爽快，竟然一下子就答应了，呵呵！ 是上海开放公司代理的，其它地方有办事处，可以直接联系的。 500ul大概850左右，买多还可以讲讲价格的。可以泡胶，液可以直接加在胶里。 我们一般都是泡胶的，效果很好！和eb泡胶一样方便，且稳定性要比eb好，不用担心分解的。 ***新出了一款花箐核酸染料，价格不错，比EB敏感，挺合适的 首页有介绍 |
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