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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 发酵罐iptg诱导
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落日余晖34

木虫 (正式写手)

[交流] 发酵罐iptg诱导 已有1人参与

楼主最近在做克雷伯氏菌(与大肠亲缘关系较近)摇瓶到5L发酵罐放大的时候，发现在添加iptg之后，菌体生物量迅速下降并且再也长不起来了，底物也不利用。采用的培养条件与摇瓶相同，iptg的添加量也一样，都为5mM，诱导时的od也相同，都为0.6到0.8左右，后期实验是否应考虑降低iptg的添加量？想请各位虫友提点意见，谢谢了。

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有时候总要努力下
1楼 2018-12-03 21:17:55
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
snoopytbw: 金币+3, 有帮助 2018-12-05 13:37:14
我们之前做大肠的时候，IPTG添加量不变，但是OD值会略微的大一点，涨到1.0的时候在去降温诱导，菌株生长的效果会好一点
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···
2楼2018-12-04 13:11:07
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落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2018-12-04 13:11:07
我们之前做大肠的时候，IPTG添加量不变，但是OD值会略微的大一点，涨到1.0的时候在去降温诱导，菌株生长的效果会好一点

不是很清楚iptg与低温诱导之间的关系……

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有时候总要努力下
3楼2018-12-05 10:32:42
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小冀-

版主 (著名写手)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落日余晖34 at 2018-12-05 10:32:42
不是很清楚iptg与低温诱导之间的关系……
...

加入iptg之后蛋白会大量表达，如果是菌体最适的生长温度，蛋白表达速度很快，容易形成包涵体，所以一般加iptg之后要低温诱导
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···
4楼2018-12-05 11:01:59
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