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落日余晖34

木虫 (正式写手)

[交流] 发酵罐iptg诱导 已有1人参与

楼主最近在做克雷伯氏菌(与大肠亲缘关系较近)摇瓶到5L发酵罐放大的时候,发现在添加iptg之后,菌体生物量迅速下降并且再也长不起来了,底物也不利用。采用的培养条件与摇瓶相同,iptg的添加量也一样,都为5mM,诱导时的od也相同,都为0.6到0.8左右,后期实验是否应考虑降低iptg的添加量?想请各位虫友提点意见,谢谢了。

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小冀-

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snoopytbw: 金币+3, 有帮助 2018-12-05 13:37:14
我们之前做大肠的时候,IPTG添加量不变,但是OD值会略微的大一点,涨到1.0的时候在去降温诱导,菌株生长的效果会好一点
···
2楼2018-12-04 13:11:07
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落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2018-12-04 13:11:07
我们之前做大肠的时候,IPTG添加量不变,但是OD值会略微的大一点,涨到1.0的时候在去降温诱导,菌株生长的效果会好一点

不是很清楚iptg与低温诱导之间的关系……

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3楼2018-12-05 10:32:42
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小冀-

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 落日余晖34 at 2018-12-05 10:32:42
不是很清楚iptg与低温诱导之间的关系……
...

加入iptg之后蛋白会大量表达,如果是菌体最适的生长温度,蛋白表达速度很快,容易形成包涵体,所以一般加iptg之后要低温诱导
···
4楼2018-12-05 11:01:59
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