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anlewo7777

木虫 (正式写手)

[交流] 大家在载体里连片段有没有发现有片段变短的现象

最近做几个序列的测序,连接后经常提到的质粒比理论值少一些,而且测序结果也显示有一段片段丢失了。
有共同经历的讨论一下吧!
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

我觉得你看一下你的目的片断中是不是有你的酶切位点,是不是在酶切时切掉了一部分。如果你的片断很长,应该在测个反向,看看有没有你的片断。
2楼2009-04-28 13:32:29
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anik

银虫 (正式写手)

估计你的片断中有酶切位点。。。。
3楼2009-04-28 18:49:11
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anlewo7777

木虫 (正式写手)

我是用的pcr扩增的,不是酶切验证
4楼2009-04-29 08:38:18
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

pcr有很高的假阳性,要验证的话还是酶切测序保险,有可能没有连上。
5楼2009-04-29 08:49:45
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shenmene

金虫 (正式写手)

贴心小棉袄

跟大家学习了!
小溪边的戏水,稻田里的长长黄黄的谷穗,池塘里的小泥鳅,夏夜里的萤火虫...谁为我摘下幽兰天空的那弯月...
6楼2009-04-29 10:17:33
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anlewo7777

木虫 (正式写手)

我测序结果显示就是少了一段呀,你们实验中没有发现这种现象吗,我用的是大肠杆菌jm109
7楼2009-04-30 10:04:18
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