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汕头大学海洋科学接受调剂
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

[求助] 水稻纹枯病菌原生质体 已有1人参与

提取水稻纹枯病菌原生质体,用0.6M的ph5.6的硫酸镁缓冲液配置1%的溶壁酶,酶解4h-6h,但是原生质体产量依然很少,有什么办法吗?
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IPCAAS

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-30 17:22:01
这是要做遗传转化呀,调整菌丝生长时间,菌丝新鲜程度可能与原生质体制备量相关,再有就是酶解的时间,酶的种类(崩溃酶、溶壁酶等)。
2楼2018-11-30 08:57:18
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by IPCAAS at 2018-11-30 08:57:18
这是要做遗传转化呀,调整菌丝生长时间,菌丝新鲜程度可能与原生质体制备量相关,再有就是酶解的时间,酶的种类(崩溃酶、溶壁酶等)。

请问有什么酶比较好用吗?我现在用的是广东微生物所的溶壁酶和sigma的纤维素酶。但是6h仍有很多菌丝没有裂解

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3楼2018-11-30 09:03:31
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


广微所的酶一般,建议用纤维素酶,几丁质酶,蛋白酶,葡聚糖酶一起用。

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4楼2018-11-30 12:37:02
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