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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 水稻纹枯病菌原生质体
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

[求助] 水稻纹枯病菌原生质体 已有1人参与

提取水稻纹枯病菌原生质体，用0.6M的ph5.6的硫酸镁缓冲液配置1%的溶壁酶，酶解4h-6h，但是原生质体产量依然很少，有什么办法吗？
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1楼 2018-11-30 08:47:26
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IPCAAS

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-30 17:22:01
这是要做遗传转化呀，调整菌丝生长时间，菌丝新鲜程度可能与原生质体制备量相关，再有就是酶解的时间，酶的种类（崩溃酶、溶壁酶等）。
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2楼2018-11-30 08:57:18
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by IPCAAS at 2018-11-30 08:57:18
这是要做遗传转化呀，调整菌丝生长时间，菌丝新鲜程度可能与原生质体制备量相关，再有就是酶解的时间，酶的种类（崩溃酶、溶壁酶等）。

请问有什么酶比较好用吗？我现在用的是广东微生物所的溶壁酶和sigma的纤维素酶。但是6h仍有很多菌丝没有裂解

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3楼2018-11-30 09:03:31
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
广微所的酶一般，建议用纤维素酶，几丁质酶，蛋白酶，葡聚糖酶一起用。

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4楼2018-11-30 12:37:02
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