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Leah_m

新虫 (小有名气)

[求助] 多糖DEAE52分离纯化 不同梯度的盐洗出来可能是同一种物质么? 已有2人参与

求助,各位大神可以帮忙看看吗?
用DEAE-52 分离多糖,分别用去离子水、0.05Nacl, 0.1NaCl, 0.2NaCl, 0.3NaCl, 0.5NaCl 洗脱,收集并冻干后用GPC测分子量,感觉出峰时间和位置都差不多,除了水以外,5个梯度NaCl 提出来的东西峰形十分相似, 这是没有提出来嘛?
参考了DEAE-52的分离原理,是阴离子交换,按道理来讲不同梯度的盐氯离子交换程度应该是不同的,洗脱下来应该不是同一种物质呀,又可能只是分子量相近但是不是同一种物质吗?
谢谢!!
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夏洛克艾华生

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先测原样品有几个峰。再测分馏出来的分子量和含糖量是不是一致,如果不一致,就不是同一个样品。
公众号:食品分析(Food_analysis), 欢迎关注!
2楼2018-11-29 20:34:23
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

原理是这样,但是有一个前提,那就是上样量合适,而且洗脱比较充分。
如果是上样量大,每一个梯度洗脱不充分,那出现交叉,重叠的峰是很可能的。
3楼2018-12-03 13:41:06
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浅谈时光123

新虫 (初入文坛)

阴离子交换柱是分带不同电荷量的多糖,一般一组分是中性多糖或者碱性多糖,后面的组分都是酸性多糖。你只是把中性多糖和酸性多糖分开了,就没有然后了。不同电荷的多糖分子量一样是完全有可能的,你没有过琼脂糖或者葡聚糖凝胶柱,过完这个,才能得到同种分子量同种电荷量的多糖

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-12-26 14:48:29
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剑客

木虫 (知名作家)

多糖过完柱子损失多么?我的只得到了差不多十分之一的上样量样品
5楼2019-01-03 23:20:50
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