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一轮明月雨

新虫 (初入文坛)

[交流] 表达载体构建已有2人参与

最近在构建载体,请问送去测序的结果与预期的一样,但是空载pbi121双酶切(sacl与bamhl)只有一条带是怎么回事吖

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zw破风

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切位点离得远吗

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2楼2018-11-26 07:39:43
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一轮明月雨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zw破风 at 2018-11-26 07:39:43
酶切位点离得远吗

远,俩酶切位点相聚1800bp多一点呢

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3楼2018-11-26 13:14:12
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zw破风

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼: Originally posted by 一轮明月雨 at 2018-11-26 13:14:12
远,俩酶切位点相聚1800bp多一点呢
...

没有切开吧,或者你试试能不能插进去东西

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4楼2018-11-26 20:15:54
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一轮明月雨

新虫 (初入文坛)

我试着做了连接反应,然后涂板,测序回来结果是对的呢,不知道为什么空载酶切只有一条带

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5楼2018-11-26 20:20:42
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一轮明月雨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zw破风 at 2018-11-26 20:15:54
没有切开吧,或者你试试能不能插进去东西
...

我试着做了连接反应,然后涂板,测序回来结果是对的呢,不知道为什么空载酶切只有一条带

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6楼2018-11-26 20:21:19
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zw破风

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一轮明月雨 at 2018-11-26 20:21:19
我试着做了连接反应,然后涂板,测序回来结果是对的呢,不知道为什么空载酶切只有一条带
...

莫非你这个本来就是酶切过的载体?哈哈,反正做出来就好了

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7楼2018-11-26 20:24:19
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一轮明月雨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zw破风 at 2018-11-26 20:24:19
莫非你这个本来就是酶切过的载体?哈哈,反正做出来就好了
...

借你吉言啦

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8楼2018-11-26 22:58:30
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四喜四喜

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我最近也在构这个载体,但是测序出现问题了,构好的载体菌液pcr可以p出条带,但是测序说无信号,我是直接把提取的质粒拿去测序的,浓度在150左右,引物是35s,不知道是哪里的问题,想请教楼主是怎么测序的

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9楼2020-07-16 10:43:01
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