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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 大肠杆菌甘油保菌
汕头大学海洋科学接受调剂
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食品考研！

新虫 (小有名气)

[交流] 大肠杆菌甘油保菌 已有2人参与

我的大肠杆菌甘油保菌为啥老是不成功，我是用30%的甘油，和液体大肠杆菌混合，比例为1：1     2:8 都试过，可是保的菌再活化摇床培养的时候总是变混很味（染杂菌）。这是为什么，为什么？要崩溃了啊。

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1楼 2018-11-22 07:52:27
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爱上灬在路上

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
涂个平板，挑单菌落，重新摇种子液。

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2楼2018-11-22 08:08:30
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1034714749

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小冀-: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-11-22 20:34:29
这是染菌啊，应该从头确定保菌的步骤，说几个关键点：
1.甘油，培养基，移液枪，枪头，等等，是否灭菌，或者有些枪头放置过久？
2.确保原大肠杆菌没有污染，稀释涂板，检查是否有杂菌，多涂几个。大肠有抗性是最好的，就抗性筛选
3.保菌步骤是否严格
4.复苏过程是否严格
5.实验室是否有芽孢杆菌等产芽孢的菌株，尽量避免同时操作
污染源没有多少，应该集中在某一个步骤中出错，建议楼主仔细回忆下
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3楼2018-11-22 11:02:01
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食品考研！

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1034714749 at 2018-11-22 11:02:01
这是染菌啊，应该从头确定保菌的步骤，说几个关键点：
1.甘油，培养基，移液枪，枪头，等等，是否灭菌，或者有些枪头放置过久？
2.确保原大肠杆菌没有污染，稀释涂板，检查是否有杂菌，多涂几个。大肠有抗性是最好 ...

好的谢谢，非常有价值。

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4楼2018-11-23 12:25:18
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