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新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 836
帖子: 5
在线: 2.6小时
虫号: 9232201
注册: 2018-06-27
专业: 细胞信号转导

[求助] 动物肝组织做WB方法？已有1人参与

请教大家，我想做小鼠肝组织的WB，请问这个肝组织取材后该如何处理？能不能请大家给我发下动物组织做WB的详细过程？拜托了！

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1楼 2018-11-21 19:19:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

himoli

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 9
帖子: 4
在线: 2.3小时
虫号: 10156334
注册: 2018-09-05
性别: MM
专业: 细胞信号转导

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

肝组织取材后要研磨提取蛋白质，这个是常规的蛋白提取方法，网上详细的步骤材料很多。一般可以买现成的蛋白裂解液，里边都已经加好蛋白酶抑制剂的，以匀浆器或研钵研磨后加裂解液离心取上清即可。其中要注意保持低温，冰上或者液氮冷冻下研钵。提取的蛋白样品就正常用于SDS-PAGE电泳了，这个也是常规的做法，一般分子生物学类的实验指导上都有的。电泳完后可以用电转仪将蛋白转移到膜上，然后这个膜进行western blot。至于用什么二抗那要看你的目的是什么了。

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