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无二硫键的包涵体复性如何考虑,万分感谢! 已有3人参与
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菜鸟正在进行包涵体复性,望大神相助! 该蛋白在大肠杆菌可溶性表达的过程中,大部分以包涵体的形成存在,各种表达条件优化都已经尝试,都没有效果。因此决定进行包涵体复性。预测该蛋白不存在分子内二硫键。请问(1)这种情况下不可溶的原因可能是什么?(2)在包涵体复性过程中,这种没有分子内二硫键的蛋白对于复性液的成分有什么特别要求?(3)如何避免形成分子间二硫键,复性液的成分需要注意什么?(4)氧化还原电势在包涵体复性过程中,除了对二硫键正常配对、避免含有二硫键的杂蛋白的影响之类的作用之外,对于复性过程还有什么关键影响,两者同时加入和不同时加入有什么区别? |
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