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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western显示条带大于理论值很多是什么原因呢？
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)

[交流] western显示条带大于理论值很多是什么原因呢？

我用50mM Tris-HCL,50mMNaCl,1mMEDTA,0.01%NP-40,10%甘油，1mM PMSF,再加上蛋白酶抑制剂提取在烟草中瞬时表达的连有myc标签的蛋白，但是用标签抗做western之后却发现目的条带的分子量高于理论值很多（～20KD）。我想请问大家，这是怎么回事？太费解了～

[ Last edited by xiaoli8609 on 2009-8-25 at 11:28 ]
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1楼 2009-04-26 22:23:23
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
不算多了，转录后修饰会引起蛋白在SDS-PAGE中显示出很不一样的大小，比如磷酸化，糖基化等，或者由于蛋白质的特殊氨基酸组成也会引起这种现象。差几十KDa都有。
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2楼2009-04-27 09:09:49
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
请问你能再说得详细一点吗？或者有这方面的资料吗？什么样的蛋白会比较容易发生这些修饰呢？有什么条件，或者有什么预测的网站或软件吗？谢谢！


除了这个原因还有其他的因素吗？
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3楼2009-04-30 11:02:33
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
我也不是很清楚了，你可以多查阅一下这个蛋白的文献，会有讨论它的的小的内容的。尤其是刚发现这个蛋白的一些文献。
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4楼2009-05-01 10:42:53
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
用在线工具分析了一下，只有一个磷酸化位点，只有这一个位点就引起了分子量成20KD的增加吗？还是会有其他一些方面的原因？请大家帮帮忙啊！
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5楼2009-05-23 11:00:05
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