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草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 我拿了一个蛋白对他进行原核和真核表达了,请问后续有什么推荐的实验可以做吗?已有2人参与

我一年前刚读研,随便找了个别人没怎么做的蛋白就去表达纯化了。  但是后续实验不知道该做啥了,有没有那种是个蛋白都可以做的实验,比如制备抗体啊然后免疫组化,或者拿真核表达的egfp标签直接亚细胞定位的实验哇之类的。。。。     不然也不知道该拿这个蛋白干啥了。。。

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草哥cium

新虫 (正式写手)

稍微有点意义就行,各路大神求助

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2楼2018-11-18 22:11:04
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1034714749

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能做的比较多啊,但总需要知道别人做过什么了
1.首先确定别人做过什么了
2.头脑风暴一下,最后把难度大的,别人做过的去掉
不清楚楼主的专业,本人做酶的经验比较多,只说几个基本的:
a.蛋白的基本性质?
b.有没有做过蛋白结晶?
c.是否参与细胞内代谢,和其他蛋白质互作?用酵母双杂,Co-IP等检测下?
d.如楼主所说,做抗体也可以,但重要的在于用这个蛋白做抗体的意义
e.也可以用原核,真核,再多表达几个系统,昆虫,酵母,哺乳动物都表达,比较这几个系统表达出的蛋白质区别
f.如果蛋白质是某种酶,还可以做很多酶学性质和催化实验
g.结合相关文献再扩展一下把。。。
3楼2018-11-19 13:28:55
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yebaba

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1034714749 at 2018-11-19 13:28:55
能做的比较多啊,但总需要知道别人做过什么了
1.首先确定别人做过什么了
2.头脑风暴一下,最后把难度大的,别人做过的去掉
不清楚楼主的专业,本人做酶的经验比较多,只说几个基本的:
a.蛋白的基本性质?
b.有 ...

你好,我最近在做一个合成酶,已经在体外重组蛋白了,做了wb,但后续就没啥思路了,我看您经验较多,想请教下后续能做些什么
4楼2021-08-12 20:14:08
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