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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 高速逆流色谱
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高歌123

金虫 (小有名气)

[交流] 高速逆流色谱

大家好，我现在想尝试一下用高速逆流色谱分些东西，虽然看了一部分文献，但是由于我们这现在还没有做这的，所以实际经验匮乏，有个地方很想不通，请大家给支支招。假如说我现在要分下某种植物根里面的东西，首先要做的肯定是提取，然后分部位或者是大孔树脂除色然后选择其中某个极性段，文献上一般是这样做的，但是我在想，他们一般都分了两三种，或者最多四五种，但是在这个极性范围内所含有的物质肯定不止这几种吧，那他们是如何排除其他几种物质的干扰的，或者是如何才能有针对性的分离他们所说的那几种啊

[ Last edited by 高歌123 on 2009-4-25 at 17:36 ]
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1楼 2009-04-25 17:23:43
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guohanyan

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
高歌123(金币+2,VIP+0):谢谢捧场 4-25 20:24
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~~ 5-14 20:57
高歌123(金币+4,VIP+0): 5-26 23:10
你问的问题我不懂得   友情顶一下，希望有高手帮解决
高速逆流色谱分享
1.逆流色谱的分离原理是利用被分离物质的分配系数差异使物质分离，而分配系数的定义为组分在固定相中的浓度与流动相浓度之间的比值。也可以说是组分在固定相中的溶解度和流动相的溶解度的比值。逆流色谱的出峰顺序为分配系数小得先被洗脱出来，分配系数大的后被洗脱下来。也可以说在流动相中溶解度大的先被洗脱，溶解度后被洗脱。所以逆流色谱的出峰顺序与被分离物质的K值有关，在固定相和流动相中的溶解度有一定关系。在含水相作为流动相的时候，一般极性大的先出来，极性小得后出来，但是出峰顺序也不是严格按照极性大小来分离，不过可以作为一种参照。
2.结构类似的物质一般K值比较相似，溶剂系统选择不好的话，有的时候会成为相邻的两个峰，靠在一起。也有相似的物质之间拉的比较开的，这个分离度还是要看分配系数的差异了。
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2楼2009-04-25 19:37:52
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电光紫外线

木虫 (著名写手)
★ ★
高歌123(金币+1,VIP+0):谢谢 4-27 14:27
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~~ 5-14 20:57
你好，我仅发表个人观点哈~
如果想准确分离所需的那几种物质，只用高速逆流色谱，根据极性分离判断肯定是不够的，在充分分离的前提下，最好涉及联用技术，比如接核磁或MS，在得到数据支持之后，确认有哪几种有影响的关键物质之后再回过头去根据性质之间的差异设计其它的更合适的分离方法~
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whereamazinghappens!
3楼2009-04-27 00:30:54
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sss841011

金虫 (小有名气)
★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~~ 5-14 20:57
高歌123(金币+1,VIP+0):谢谢 5-15 08:24
张天佑老师做的很好。
前天他在“第五届中药现代化发展论坛暨2009现代化中药提取物关键技术产业化学术报告大会”上做了一篇关于“逆流色谱技术在对照品标准工作中的应用”的报告。
可惜我去晚了，没能听成。
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4楼2009-05-14 19:56:05
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liuke009

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 5-14 20:55
高歌123(金币+1,VIP+0):谢谢啊 5-15 08:24
高速逆流色谱的分离肯定不够，还需要RP-MS充分分离鉴定，确定馏分出峰时间后可以进行相应的收集
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5楼2009-05-14 20:25:43
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高歌123

金虫 (小有名气)

呵呵

我们这现在只有液相色谱，所以我现在很想知道，如何才能将液相色谱中的峰和高速逆流色谱中的峰对应起来啊，当然这里指的是集中含量高的组分
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6楼2009-05-15 08:34:02
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lifeibao

★
高歌123(金币+1,VIP+0): 5-15 21:53
引用回帖:
Originally posted by guohanyan at 2009/4/25 19:37:
你问的问题我不懂得   友情顶一下，希望有高手帮解决
高速逆流色谱分享
1.逆流色谱的分离原理是利用被分离物质的分配系数差异使物质分离，而分配系数的定义为组分在固定相中的浓度与流动相浓度之间的比值。也可 ...

通俗易懂，顶一下！最好再把逆流色谱分离的过程或叫操作降解一下，谢谢！
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7楼2009-05-15 09:45:26
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zhl406

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流！ 6-17 22:57
我们实验室也用告高速逆流色谱来分离植物中的有效成分，不过我们一般是将其和柱色谱等分离手段结合起来分离的，还有就是可以通过重结晶的方法来粗分，我的样品就是在大孔树脂上梯度洗脱下来然后重结晶就有很多固体析出，都是几个物质的混合物，然后再拿这些混合物来分离是很好的，我拿它和未进行重结晶的浸膏过HSCCC发现峰形好看了很多，也少了很多杂峰。不知道你的样品是什么，不过我觉得先用常规的分离手段进行粗分后在过逆流会省事很多。
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艰难困苦玉汝于成
8楼2009-06-17 16:00:55
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