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gnijgnep

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC用过盐后该如何冲洗柱子?

请问,HPLC用过盐后该如何冲洗柱子?
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pfizer2001

金虫 (著名写手)

第一 如果你的柱子不是能够承受纯水,请不要用纯水,即使是95%的水也不可以,按照工程师和我自己看的书上说,.是键合相特别容易COLLAPES就是塌陷. 看你用的是BUFFER 还是IONPAIR,如果是BUFFER ,一般推荐的方法是用90%的水冲30个柱体积,然后换纯甲醇冲,最后按一定比例的甲醇水保存.如果是IONPAIR就是离子对试剂,则冲洗比较麻烦了,就和当初平衡一样,需要很长时间的冲,而且最好改变梯度来冲洗.  
离子对对柱子的损伤是很大的,所以一定要按照标准来冲洗,还有如果你的样品比较多,最好把用离子对试剂的柱子单独保存,单独用,不要把你所有的柱子都过一遍离子对,到时候就好了!还有很多的不同情况是根据你的样品来决定的,中药 或者大分子或者其他的,水溶的脂溶的.自己分析一下就知道如何冲了.
8楼2009-04-28 15:28:13
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LV栀子SHU

木虫 (知名作家)

笨笨家族之笨笨猫~~


chiraler(金币+1):感谢参与讨论
5%甲醇+95%水  30MIN

20%甲醇+80%水 20MIN

50%甲醇+50%水20MIN

70%甲醇+30%水20MIN

100%甲醇30MIN
我这样冲洗的

有时候时间不够
5%甲醇+95%水  30MIN
50%甲醇+50%水20MIN
100%甲醇30MIN
与其找错误的人相伴,不如选择单身。
3楼2009-04-25 19:54:16
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uliya809

木虫 (正式写手)


chiraler(金币+1):感谢参与讨论
就是在正常的冲洗的情况下时间变长,特别是低甲醇浓度的时间
4楼2009-04-25 20:08:34
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wwweeerrr

捐助贵宾 (著名写手)


chiraler(金币+1):感谢参与讨论
其实不用那么复杂。
我们都是用10%左右的甲醇谁冲洗20-30分钟,然后用80%的甲醇水冲洗,就可以了。
柱子用了7年,没有一点问题。
5楼2009-04-25 21:05:30
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