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[交流] 种子内生细菌的培养与鉴定（赠送20金币）

内容：种子内生细菌的如何培养与如何鉴定。
要求：回复字数大于100字，细菌鉴定尽量要从分子水平考虑。
谢谢喽！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！

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1楼 2009-04-22 22:42:02

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至尊木虫 (著名写手)

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王利8812(金币+1,VIP+0): 4-23 16:01

植物内生细菌的分离、分类、定殖与应用之一 -- 行业创新信息情报服务平台
                           生命科学 __ 生命科学　

                     植物内生细菌的分离、分类、定殖与应用之一
                     供稿人：卢镇岳冯永君审校人：阮梅花供稿时间：2006-9-20

                     　摘要：

                           植物内生细菌已成为国内外的研究热点，目前已从植物中分离得到许多不同种属的植物内生细菌，其中有的具有促生与防治病害等对宿主植物有利的作用，而一些则具有潜在的致病性。研究人员利用多种方法对植物内生细菌的内生定殖行为进行研究，发现了有意义的定殖规律，例如，某种植物内生细菌对其宿主的侵染能力明显强于另一种内生细菌。目前，尽管植物内生细菌还有不少问题有待解决，但它在农业上的巨大应用潜力业已彰显。

                     　
                     　人们已认识到化肥和农药在农业应用中的弊端，但目前仍无更合适的替代品，它们仍在农业生产中被广泛使用。而存在于土壤中或植物体内的具有控制病害与促生增产潜力的微生物将可能成为一个有效选择，其中植物内生细菌最为重要。
                     植物内生细菌是从表面消毒的植物组织中分离得到或从植物内部获得的、能够定殖在健康植物细胞间隙或细胞内，并未使植物的表型特征和功能发生改变的细菌[1~4]。绝大部分内生细菌对植物不造成实质性危害，并与宿主植物建立和谐联合共生的关系[3~6]。植物内生细菌在自然界中广泛存在，现已从多种植物中分离到不同种属的内生细菌，它们在植物体中的数量很大，在植物根组织中能达到105
                     CFU/g鲜重[7]，而且它们的生物学功能多种多样[2~6]。植物内生细菌已成为近十年内微生物研究的一大热点，国内外有关研究报道不断增加，主要涉及植物内生细菌的分离、鉴定、生物学功能以及定殖过程。


                     1　植物内生细菌的分离、鉴定与分类

                     自20
                     世纪中叶起，国外就已经在多种植物中分离得到了不同种属的内生细菌[7~10]。国内虽起步较晚，但有人从番茄、棉花、富贵竹、辣椒、哈密瓜、马尾松、烟草和水稻等不同种类的植物中分离得到多种内生细菌[11~24]，主要有以下几个属：芽孢杆菌属(Bacillus)、黄单孢菌属(Xanthomonas)、假单孢菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwinia
                     )及短小杆菌属(Curtobacterium)，其中属于芽孢杆菌属的菌株数在多种植物中都为最多。研究者们统计发现，一般在植物根部与种子中内生细菌的含量比较高，而在茎和叶中相对较少。不同植物，有的根部最多，有的则种子中最多，然而也有一些从叶中分离到的内生细菌数会比根部多。马冠华，肖崇刚[21]认为，内生细菌在同种植物不同部位的分布可能会受具体生长环境中的多种因素影响，例如一些地区常下酸雨，叶片中的内生细菌数量将可能随之而发生变化。文献21~23还指出植物生长发育的不同时期，体内内生细菌的总数以及各组织内的内生细菌数会有所变化，生长迅速的植物个体以及生长迅速的植物组织中内生细菌的数量较多。

                     内生细菌分离与鉴定的方法一般都依赖于传统的平板培养方法，该方法简便、经济，也容易普及，其主要缺点是无法分离得到不可培养的内生细菌，因而不能准确判断植物内生细菌的数量与种类。近年来，以16S
                     rRNA基因作为系统发育标记为基础，利用非培养方法检测微生物种群的技术应用于植物内生细菌研究，克服了传统培养方法的缺陷，为检测植物内生细菌种群多样性提供了更有效的手段[3]。

                     对于现已分离得到的植物内生细菌，一般可分为专性内生细菌与兼性内生细菌，前者指至今只能在植物体内分离得到的细菌；后者指能在植物根际与土壤中分离得到，也能在植物体内分离得到的细菌[7]，而且种类居多。根据内生细菌对宿主植物生长发育的影响可以将其分成三类：第一类对植物的作用是中性的，即尚未发现它们的内生定殖对宿主植物生长与繁殖有影响；第二类对植物生长发育有促进作用，如能提高宿主植物抗病、抗逆能力，或能通过固氮与分泌激素促进植物生长发育等；第三类对植物生长具有负面影响[7]，在特别条件下接种到原宿主植物或另外的宿主植物会诱发植物病害。但需要注意的是，同种细菌定殖于不同宿主植物可能对宿主植物产生不同的影响。
参考文献

                     [1]    冯永君, 宋　未. 植物内生细菌. 自然杂志, 2001, 23(5): 249~252

                     [2]    杨海莲, 孙晓璐, 宋　未. 植物内生细菌的研究. 微生物学通报, 1998, 25(4):
                     224~227

                     [3]    韩继刚, 宋　未. 植物内生细菌研究进展及其应用潜力. 自然科学进展, 2004, 14(4):
                     374~379

                     [4]    刘云霞. 植物内生细菌的研究与应用. 植物保护, 1994, 20(5): 30~32

                     [5]    文才艺, 吴元华, 田秀玲. 植物内生菌研究进展及其存在的问题. 生态学杂志, 2004,
                     23(2): 86~91

                     [6]    孔庆科, 丁爱云. 内生细菌作为生防因子的研究进展. 山东农业大学学报, 2003,
                     32(2): 256~260

                     [7]    阎孟红, 蔡正求, 韩继刚, 等. 植物内生细菌在防治植物病害中的应用研究. 生物技术通报,
                     2004, 3: 6~12

                     [8] Steenhoudt O, Vanderleyden J. Azospirillum, a
                     free-living nitrogen-fixing bacterium closely associated
                     with grasses：genetic, biochemical and ecological
                     aspects. FEMS Microbiol Rev, 2000, 24: 487~506

                     [9] Sturz A V, Christie B R, Matheson B G, et al.
                     Biodiversity of endophytic bacteria which colonize red
                     clover nodules, roots, stems and foliage and their
                     influence on host growth. Biol Fertil Soils, 1997, 25:
                     13~19

                     [10] Dong Z M, Canny M J, McCully M E, et al. A
                     nitrogen-fixing endophyte of sugarcane stems. Plant
                     Physiol, 1994, 105: 1139~1147
                     　