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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】质粒提取
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我啊

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【交流/求助】质粒提取

从DH5α中提取连接了3000左右bp的psp73质粒，出现三条带，前两条带靠的很近，颜色比较淡，后一条离得特别远，也比较亮，这是怎么回事？

[ Last edited by amisking on 2010-1-11 at 17:26 ]
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1楼 2009-04-21 10:56:31
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fenghaizai

金虫 (小有名气)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you for participation 4-21 14:54
正常。
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2楼2009-04-21 13:53:42
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longxiange520

金虫 (小有名气)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thank you for share 4-21 14:54
质粒正常情况下电泳时可能出现有3条带的，最前面的是超螺旋状态的、其次是线状的、最慢的是开环的。其中超螺旋状态的是最主要的。有时候也可能是2条带。
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3楼2009-04-21 14:37:08
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
用灭菌双蒸水代替Elution buffer就会只有一条带了。
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Thank-you，so-blue.
4楼2009-04-21 15:03:09
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我啊

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by fenghaizai at 2009-4-21 13:53:
正常。

那我要怎样才能确定哪个是我想要的带阿？
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5楼2009-04-21 16:43:22
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我啊

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by longxiange520 at 2009-4-21 14:37:
质粒正常情况下电泳时可能出现有3条带的，最前面的是超螺旋状态的、其次是线状的、最慢的是开环的。其中超螺旋状态的是最主要的。有时候也可能是2条带。

在这种情况下，三条带是不是应该非常靠近还是不一定
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6楼2009-04-21 16:44:28
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lifefamily

我晕~~
都是同样的质粒啊，只不过拓扑结构不同而已。
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7楼2009-04-21 16:45:04
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message

铁虫 (初入文坛)
很正常，提的不错啊
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8楼2009-04-21 16:45:24
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我啊

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-4-21 15:03:
用灭菌双蒸水代替Elution buffer就会只有一条带了。

Elution buffer是质粒提取试剂盒中的4液吗？
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9楼2009-04-21 16:45:39
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我啊

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lifefamily at 2009-4-21 16:45:
我晕~~
都是同样的质粒啊，只不过拓扑结构不同而已。

我没有用marker，用别的质粒作参考， 但是感觉大小不对阿
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10楼2009-04-21 16:48:14
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