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kangxueli

[交流] 求助:双链DNA如何解链

根据文献上说的,在80—90℃加热15分钟,然后在冰水混合物中迅速冷却,但是在260nm处的紫外吸收值并没有增加,后来我加热了一个小时也没有解开。
  求求各位大侠,帮帮忙,因为单链DNA实在太贵了

[ Last edited by amisking on 2009-5-28 at 23:01 ]
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695

木虫 (职业作家)

哦,不是常见的DNA变性就是在90度条件下5分钟,快速冷却吗?
2楼2009-04-19 17:12:01
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

多大的片段
3楼2009-04-19 17:28:03
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kangxueli

我也不知道,感觉好像是冷却的时候又复性了
4楼2009-04-19 20:55:34
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kangxueli

具体过程或者冷却的时候应该注意什么问题,请帮帮忙啊
5楼2009-04-19 21:07:40
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shengsheng

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
变性后的单链要用0.14%的氢氧化钠保存
6楼2009-05-28 22:57:04
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ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
[quote]Originally posted by shengsheng at 2009-5-28 22:57:
变性后的单链要用0.14%的氢氧化钠保存 [/quote

具体过程如何操作?是在加热变性后马上就加入0.14%的氢氧化钠吗?
还是冷却后再加入?
感觉冷却的时候肯定要复性
7楼2009-05-28 23:00:42
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
肯定又复性了。

加NaOH有效吗?
8楼2009-05-28 23:05:48
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gskekeai

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
变性94或者95度五分钟就可以了,变性的时候我们一般加甲酰胺,防止复性,变性完后并与迅速冷却。
9楼2009-05-29 09:33:52
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