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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教关于单酶切连接的问题
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足下客

木虫 (正式写手)

[交流] 请教关于单酶切连接的问题

我想把一个基因片段经单酶切后连接到一个载体上，请问怎样才能减少载体的自连几率呢？
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1楼 2009-04-19 11:08:53
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zhyzx

金虫 (小有名气)
选择最合适的酶
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2楼2009-04-19 11:16:47
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★
足下客(金币+1,VIP+0):谢谢解答 4-19 14:22
去磷酸化，把载体和基因片段去磷酸化，可以减少自连的几率
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3楼2009-04-19 12:34:49
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anik

银虫 (正式写手)
★
足下客(金币+1,VIP+0):谢谢解答 4-19 14:22
楼上的方法是最常用的。
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4楼2009-04-19 13:18:59
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by elvias at 2009-4-19 12:34:
去磷酸化，把载体和基因片段去磷酸化，可以减少自连的几率

都去磷酸化,那基因和载体还好连吗
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5楼2009-04-19 14:29:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
足下客(金币+1,VIP+0):谢谢帮助 4-20 10:58
一般只需载体去磷酸化，都去磷酸化连接效率不好，纯靠碱基氢键作用力……
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6楼2009-04-19 14:46:06
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