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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 关于PCR扩增条带回收的一个怪异现象

今天做实验,我们把一条PCR扩增出来的的DNA片段条带进行切胶回收,然后再把回收的片段再跑了一次电泳验证。。没想到再这个条带的下方出现了另一个特异性条带,这个条带大约在目的条带的2倍bp位置处。。。
     这是为什么???
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spiderboy

金虫 (正式写手)

一楼的虫友,我用的是生工的
4楼2009-04-18 22:43:53
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daigakusei

铁虫 (初入文坛)


spiderboy(金币+1,VIP+0):谢谢。。不过回收过程中会有复性这个过程吗? 5-7 07:34
与回收过程中,DNA不正确的复性有关,你用的是哪个公司的试剂盒?
2楼2009-04-18 21:52:17
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Milanmy

银虫 (小有名气)

我有一次做完PCR后电泳,一切都正常,第二天准备切胶时,再跑电泳结果条带大小就变了,出现一系列成倍数的条带,正常大小的条带没有了,最亮的是二倍大的条带,不知道跟楼主的现象是不是一个原理。
3楼2009-04-18 22:07:14
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spiderboy

金虫 (正式写手)

二楼虫友,估计你情况和我一样。。我那个新出现的条带也是在2倍大的位置。
但是,你是第二天切胶,,似乎要当天,因为胶放久了,DNA会断的
5楼2009-04-18 22:45:34
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