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Daisy3382

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
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虫号: 592807
注册: 2008-09-05
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专业: 色谱分析

[交流] 新手求助：高效液相相关的！

我是一名新手，最近一直在做高效液相，完全自己在摸索，在使用的过程中有些地方有疑问，想请各位大侠们帮帮忙给点意见哈！问题如下：
1.我用的0.2molL的磷酸二氢钾缓冲液，浓度是不是很大能？听说浓度大了对柱子损伤比较大，而且使用的过程中在有些阀的部位都会有结晶。
2.用了缓冲液以后是要用水冲洗的吧？我用的是C18的柱子，长时间用水冲洗会不会对柱子有很大伤害啊？用什么洗比较好呢？
3.有个很奇怪的现象，明明缓冲液在ph＝3.75的时候峰有分但不很开，为了峰分的更好一些，我将缓冲液的ph调节了，用了ph＝5的缓冲液，分不开峰，然后再用3.75的缓冲液峰也分不开了，很不明白！
各位，指教指教啊！先谢过啦！

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1楼 2009-04-17 10:24:24

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haotian3688

应助: (幼儿园)
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虫号: 749578

引用回帖:

Originally posted by Daisy3382 at 2009-4-17 10:24:
我是一名新手，最近一直在做高效液相，完全自己在摸索，在使用的过程中有些地方有疑问，想请各位大侠们帮帮忙给点意见哈！问题如下：
1.我用的0.2molL的磷酸二氢钾缓冲液，浓度是不是很大能？听说浓度大了对柱子 ...

最好用10％的甲醇－水冲柱子，纯水容易把柱子填料冲塌了。
0.2M的磷酸盐浓度是大了点，我才用0.05M的。不过这个也要看实验情况。
分离度不只跟pH有关。你那个换回来后又分不开了，很可能是柱效下降了。用纯有机溶剂小流速冲柱子几个小时试试看。