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ldxmhyq

木虫 (著名写手)

[交流] 请教:细菌基因组DNA提取

各位前辈,最近我在提取细菌基因组DNA,条带跑出来发现杂乱无序,虽在23Kb处有条带,但相对微弱,强条带位于凝胶底部,不知何故?请帮助分析原因,感激不尽(使用的是TIANGEN试剂盒)
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做最好的自己,我能!
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sxxuan

金虫 (著名写手)

后面的亮带应该是RNA拖尾吧。我猜是DNA的质量不太好,抽提的时候混合充分,动作尽量的轻柔一点。而且菌体量不要太多,多了反而影响提取。
你的日子如何,你的力量也必如何!
2楼2009-04-16 18:21:04
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grapepai

铁虫 (小有名气)

啥细菌?
3楼2009-04-16 19:49:29
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恒星年

银虫 (正式写手)

下面的应该是RNA吧,用RNA酶消化下再跑电泳吧,那样的话条带会更好看些
4楼2009-04-16 19:54:14
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恒星年

银虫 (正式写手)

而且你的蛋白似乎没除干净,孔里面显白色了。
5楼2009-04-16 19:54:53
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message

铁虫 (初入文坛)

需要用RNA酶消化,再增加一点菌的量
6楼2009-04-16 21:51:03
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zhaoy02007

银虫 (初入文坛)

什么细菌的DNA,难道你提取的细菌基因组只是你说的23Kb,很多细菌的基因组DNA核酸电泳是跑不出来的。例如结核、沙门等全基因都是400到500多万bp。所以问楼主,你提取的是什么细菌的基因组。核酸电泳不是客观的鉴别方法。直接上PCR可方便鉴定。
进化中没有失败的物种基因中没有无用的序列生物中没有长久的永恒
7楼2009-04-16 22:42:35
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ldxmhyq

木虫 (著名写手)

谢谢生物科学版的专家们,我再试试,我提的是乳酸菌DNA,环状,位置应跑在23kb那,marker是Hind III
做最好的自己,我能!
8楼2009-04-17 08:43:38
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

基因组不发生断裂很难吧
9楼2009-04-17 10:23:05
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2008116068

木虫 (著名写手)

好像没提出来吧,细胞壁没破开吧,时间长一点
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
10楼2009-04-19 22:43:44
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