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铜虫 (小有名气)

[交流] 双酶切

如果载体上两个酶切位点是相邻的，但没有公用碱基，就是连续的，做双酶切有影响吗？

如下图的AvrⅡ（CCTAGG）和NotⅠ（GCGGCCGC）相邻的情况，
我选取这两个酶切位点加在引物5'端，在它们中间要插入目的片段的

1楼 2009-04-15 22:36:29

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银虫 (初入文坛)

分步酶切试试，相邻的酶切位点同时加入限制酶进行双酶切反应效果不会太好

3楼2009-04-16 09:34:12

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银虫 (初入文坛)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~ 4-16 11:11

因该是会受到影响的，大部分的酶都会有相应数量的保护碱基。只有少数的一些酶不需要保护碱基也能切开，如Sal I、Spe I等。

进化中没有失败的物种基因中没有无用的序列生物中没有长久的永恒

2楼2009-04-16 00:16:05

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银虫 (小有名气)

会有影响,但影响不大,进行双酶切没有问题

5楼2009-04-16 17:01:16

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