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caiqingchong

木虫 (著名写手)

[交流] 关于两个基因共表达的问题

我打算在一个质粒同时表达两个外源基因,而只用一个启动子,前一个基因的末端为终止密码子TAA,再向后为后一个基因的RBS序列及ATG密码子。

我想问的是,在前一个基因TAA与后一个基因的RBS之间需要加多长的片段合适,这对基因表达影响打不,之间的片段碱基组成有讲究吗?

请各位网友不吝赐教,谢谢!
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anik

银虫 (正式写手)

这个我还是第一次知道,麻烦楼主有人知道的话,告我一声,我也想了解一些。谢谢
2楼2009-04-15 21:34:32
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dongjiqiao

铁杆木虫 (著名写手)

我也想知道~~~~
long,longlong.
3楼2009-04-19 16:50:33
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

我也在做同时表达两个基因,我的两个基因在基因组里是连在一起的,前一个基因有终止密码子,我就直接把两个基因一起克隆出来了,不知道行不行,近期就会做的,楼主什么时候做呢?我也想知道。同时请教一下,载体上如果没有给出RBS位点,怎么判断出来呢?比如pSTV28
4楼2009-04-19 18:52:17
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speculiar

银虫 (小有名气)

前一个基因的TAA与后一个基因的RBS之间的距离好像没有讲究吧。只不过你的后面一个基因的表达量可能会比前一个基因低一些,因为它的RBS离启动子远。
如果你想要两个基因表达量一样的话,可以构建双表达盒质粒。
5楼2009-04-19 22:19:45
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hutouye

木虫 (小有名气)

同样的问题,已经连在一块,但后面一个基因貌似没表达!原因还不清楚!有人做过低拷贝载体的共表达吗?表达量是不是会更少啊?
6楼2009-05-19 10:49:12
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