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pantera

木虫 (正式写手)

[交流] 关于过柱子的疑问

目前实验中有个样品要进行硅胶柱分离,1:9的甲醇和三氯,跑板效果很好

但是装柱子的时候感觉硅胶沉的非常慢,不知是何道理

这个展开剂体系是否有什么问题,请赐教
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gina9887

木虫 (著名写手)


pantera(金币+1,VIP+0):3Q 4-15 08:58
跑板和装柱的比例是不一样的,也就是说,1:9的甲醇和三氯
你上柱子就得从氯仿甲醇27:1开始跑。
硅胶沉得慢,还可能是你棉花塞多了
2楼2009-04-15 00:54:44
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pantera

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by gina9887 at 2009-4-15 00:54:
跑板和装柱的比例是不一样的,也就是说,1:9的甲醇和三氯
你上柱子就得从氯仿甲醇27:1开始跑。
硅胶沉得慢,还可能是你棉花塞多了

为啥要27:1开始跑呢》

我的是沙板柱子,而且前天过另一个东西的时候(石油醚 乙酸乙酯展开)跟目前的现象是不一样的
3楼2009-04-15 00:59:36
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yufeng307

至尊木虫 (职业作家)

★ ★ ★
pantera(金币+3,VIP+0):3Q 4-15 08:59
装柱子的时候可以用纯的氯仿装柱,这样应该就不会出现沉积慢的问题了!
不过你用的大概是湿法装柱吧,建议可以用干法装柱,比较方便,先用水泵连接柱子底部抽气的情况下,加入干硅胶到你要的长度,然后用展开剂或者纯的氯仿从上倒入,到展开剂到达柱子底部后,关掉柱子沙星处的活塞,撤除水泵,然后上面用气(加压过柱用的氮气或者空气)将溶剂压平(如果有气泡,用展开剂多压几次就去掉了),然后上样即可!
如果没有加压装置,此法就不太适合了!
在实验中找乐趣
4楼2009-04-15 02:13:37
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yufeng307

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
pantera(金币+2,VIP+0): 4-15 08:59
忘了一个问题了,过柱的展开剂比例是按照你爬板的Rf值来计算的,如果在0.2-0.4之间,是可以用你爬板时的比例过的,如果大于0.5,建议放大比例!
以上均是在加压过柱的条件下的情况,常压可以在0.5左右就行了!
在实验中找乐趣
5楼2009-04-15 02:17:07
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timberwolves

木虫 (正式写手)

★ ★
pantera(金币+2,VIP+0): 4-15 08:59
应该改变比例,把极性改的比跑板稍小点 ,因为柱子的柱效没有板子的高,板子可分柱子不一定可分。楼主参考 !!
笑看金币,资源共享,利人利己,共同进步!!
6楼2009-04-15 08:29:52
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myselfsky8159

木虫 (著名写手)


pantera(金币+1,VIP+0):3Q 4-15 08:59
我现在也在过柱,呵呵.
  也是用甲醇和氯仿体系洗脱...感觉还行,以前用乙酸乙酯和石油醚体系都洗不出东西来....暂时还没有碰到什么大问题,呵呵.

[ Last edited by myselfsky8159 on 2009-4-15 at 08:36 ]
7楼2009-04-15 08:33:34
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leonumn

铁杆木虫 (著名写手)


pantera(金币+1,VIP+0):3Q 4-15 09:00
过柱时调整甲醇和三氯甲烷的比例到Rf 值为: 0.1-0.2  最好.
8楼2009-04-15 08:51:00
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