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love_st

金虫 (著名写手)


[交流] PCR buffer成分

做了这么久的PCR,还不知道PCR buffer的具体成分,有谁能够知道,分享下撒
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makubex83

至尊木虫 (知名作家)

我想问一下,宝生物的buffer有两种,一种是Mg+离子和buffer分开的,但是浓度是25nm的,另一种是buffer和mg+是在一起的,但是Mg+浓度是15nm的,有什么区别么,我两种都分别用过但是发现时15nm的mg+离子和buffer混在一起效果好,大家那位高人指点我一下,为什么呵呵
4楼2009-05-07 23:11:51
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zhaoy02007

银虫 (初入文坛)

一般常用的10*PCR buffer的成分为:Tris-HCl pH8.5  100mM、KCl 500nM、MgCl2 15nM,我们用的Buffer有时候会发现Mg2+ free,10*PCR buffer冷冻后,Mg2+会形成一个浓度梯度,所以使用时需要完全化冻并混匀离心后在使用。

[ Last edited by zhaoy02007 on 2009-4-16 at 09:15 ]
进化中没有失败的物种基因中没有无用的序列生物中没有长久的永恒
2楼2009-04-16 00:45:01
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kivifruit

新虫 (初入文坛)

请问楼上Tris-HCl pH8.5  100mM是怎么配置的
3楼2009-05-07 18:38:00
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