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runma959

金虫 (初入文坛)

[交流] Real-time PCR 如何检测基因从不表达到表达

背景:
一个基因在体外不表达,但是在体内表达;

问题:
1,对于QRT-PCR来说,阴性参照(不加模板)的Ct值一般是多少? 理论上是不是无穷大?
2,不表达的基因的Ct值是否等同于阴性参照的Ct值? 或者一般有一个默认的比较大的Ct值?
3,如果基因的表达是从无到有,那么一般如何计算基因的表达量? (不可能以一个较低的Ct值去减一个理论上无穷大的值吧)。 在这种情况下,是否需要调节阈值去计算基因的表达量?

多谢,比较罗嗦,见笑了
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祸兮福所倚,福兮祸所伏
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

1、是
2、这个基因是否完全不表达?(是)还是说有弱的本底表达?(可能能够检测到,但Ct很高)
3、直接写undectectable,然后无视,直接比较后面的各组
2楼2009-04-14 13:50:37
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

LZ,这个专题回答了你所有的疑问。

用于检测细胞基因转录水平的实时定量PCR 的操作流程.PDF

给我个金币吧

[ Last edited by HarveyWang on 2009-4-14 at 14:19 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-04-14 14:18:06
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无语8887

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用于检测细胞基因转录水平的实时定量PCR 的操作流程.PDF
花钱下了一份,得好好学习一下
4楼2009-08-10 09:00:45
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307406735

顶一下,看看
5楼2009-12-03 13:20:00
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云游一

新虫 (初入文坛)

很受用的帖子
6楼2010-03-30 12:19:07
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