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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 放线菌部分基因（高GC）PCR扩增
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J1663141418

新虫 (初入文坛)

[求助] 放线菌部分基因（高GC）PCR扩增 已有1人参与

请问大家有没有Taq酶推荐呀？我的目标序列（两三百bp）GC含量高达70%，用一般的Taq扩不出条带，后面改进了，试了好几种酶但总出现非特异性条带，看了赛默飞和Takara的高GCbuffer高保真的酶，但种类太多不知道选那一款合适，希望有经验的小伙伴给点Tips，给点意见！感谢
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1楼 2018-11-08 21:40:42
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武鑫鑫

新虫 (著名写手)
★
J1663141418(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-11-09 09:27:34
加一点DMSO

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2楼2018-11-08 21:42:04
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J1663141418

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武鑫鑫 at 2018-11-08 21:42:04
加一点DMSO

试过了，而且买的Taq酶配套的buffer里面也有DMSO成分，也得不到目标条带甚至扩不出条带
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3楼2018-11-09 09:39:52
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有专门针对高GC含量的PCR程序，甚至需要添加PCR enhancer
Proofast Max super-Fidelity DNA Polymerase 用过还不错，可以参考他们的说明书
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4楼2019-11-15 18:16:04
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by JAYWEN书生 at 2019-11-15 18:16:04
有专门针对高GC含量的PCR程序，甚至需要添加PCR enhancer
Proofast Max super-Fidelity DNA Polymerase 用过还不错，可以参考他们的说明书

http://www.atgbiotechnology.com/productinfo/886476.html
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5楼2020-03-11 15:46:46
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