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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR污染问题
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moyu墨鱼

新虫 (小有名气)

[求助] PCR污染问题

发现PCR阴性对照有较亮条带，这两天以sul2基因为例做了阴性对照实验，把可能的污染条件都一一排除了，还是有较亮条带。条件改正如下：95℃空跑PCR仪30min，换新电泳液，换新灭菌水，枪头高压蒸汽灭菌，移液枪在紫外灯下灭菌15min，在超净工作台进行PCR加样，电泳时阴性对照和实验组加到Marker两边。已经找不到问题出在哪了，请各位知道的帮帮忙吧！

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1楼 2018-11-06 16:41:31
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)
试剂呢，有没有排除
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once you've accepted your flaws, no one can use them against you.
2楼2018-11-06 16:45:24
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moyu墨鱼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 过烟云烟 at 2018-11-06 16:45:24
试剂呢，有没有排除

Taq酶也换了新管的。

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3楼2018-11-06 16:55:10
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moyu墨鱼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 过烟云烟 at 2018-11-06 16:45:24
试剂呢，有没有排除

除了模板DNA是以前提取好冻存的，PCR体系中的引物，灭菌水，Taq酶都是换的新的

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4楼2018-11-06 16:59:43
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