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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 求细菌crispr/cas9引物设计方法？
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amy赫敏

新虫 (初入文坛)

[求助] 求细菌crispr/cas9引物设计方法？ 已有1人参与

想咨询一下，有没有知道细菌crispr/cas9引物设计方法的？求助

@biostar2009 发自小木虫Android客户端

[ Last edited by 渊博震天 on 2018-11-1 at 15:00 ]
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1楼 2018-11-01 12:21:41
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zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by amy赫敏 at 2018-11-01 16:14:24
载体构建的，需要设计含有PAM的目的基因靶点，再将此序列与载体链接，您知道吗？
...

正向引物就是你设计的gRNA，反向引物与正想引物互补，前后再添加酶切位点保护碱基之类的就行了
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4楼2018-11-01 16:31:33
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zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么引物？gRNA载体构建还是KO/KI鉴定
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2楼2018-11-01 16:05:12
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amy赫敏

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2018-11-01 16:05:12
什么引物？gRNA载体构建还是KO/KI鉴定

载体构建的，需要设计含有PAM的目的基因靶点，再将此序列与载体链接，您知道吗？

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3楼2018-11-01 16:14:24
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amy赫敏

新虫 (初入文坛)
那您能具体告诉我一下正项引物怎么设计吗？是需要设计几段然后overlap吗？如果方便可以加个QQ或者其他联系方式吗？谢谢了

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5楼2018-11-02 12:03:28
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