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高思妮

木虫 (小有名气)

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专业: 肿瘤诊断

[交流] pcr结果全部是阴性已有3人参与

大家好！最近做实验遇到些麻烦！请大神帮帮忙！实验目的是测定组织样本中app基因的表达，但是pcr结果出现假阳性（之前测的阳性样本重新跑电泳全部呈现阴性），可以排除是电泳缓冲液和核酸染料的问题，引物也是新购的，基本可以排除引物问题，样本本身也是新提的，浓度也没问题，应该不存在样本损坏一说，请大神帮帮忙，分析一下是哪里出现了问题！谢谢！

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1楼 2018-10-31 21:14:53

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安静de执着14

新虫 (著名写手)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

★
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我觉得你可以先把你的电泳图放上，看看大家有什么高见吗

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2楼2018-10-31 21:26:19

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elmanbio

金虫 (小有名气)

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注册: 2017-07-28
专业: 人类遗传学

★
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做一下阴性对照，看看没有模板的情况下是什么结果
如果也有条带，那么水可能有问题或者做实验的地方污染或者是pcrmix已经污染
建议：换个地方，pcrmix新开一管，水也用新的，如果有必要的话，可以在设计1-2对引物，还有问题欢迎私聊

3楼2018-11-01 08:31:02

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LemnisCare

禁虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

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4楼2018-11-19 13:55:47

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