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娇娇花儿

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR延伸时间 已有7人参与

问一下各位虫友,PCR延伸时间长,大概2500bp,设置了3min的延伸时间,会影响到实验结果吗?

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luckydog52

木虫 (著名写手)


渊博震天: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-23 22:51:33
会,但是影响不大

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自信源于一次次成功的积累
2楼2018-10-23 21:55:28
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learner_zyj

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
根据酶的说明书设定,不同酶扩增能力不同

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3楼2018-10-24 18:04:14
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draco1987

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得时间没问题啊,影响不大
4楼2018-10-29 13:46:49
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superharry

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-11-20 10:07:51
要看酶的延伸速度,如果按常规的1kb/min,你设置的时间影响不大。
5楼2018-11-02 09:32:58
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_小小鸟

金虫 (正式写手)

御林军

不好说啊
一米阳光照大地。。。
6楼2018-11-05 15:01:43
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温柔冷漠

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般的酶,影响不大。
7楼2018-11-20 09:32:20
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御风(远)

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by superharry at 2018-11-02 09:32:58
要看酶的延伸速度,如果按常规的1kb/min,你设置的时间影响不大。

常规的1kb/min已经是最最最最最普通的聚合酶了,可以去了解下KAPA2G Fast HotStart DNA Polymerase(Use 1 sec extension per cycle for targets ≤1 kb, and 15 sec/kb for longer fragments, or to improve yields),看上去扩增超快的酶。
8楼2018-11-20 13:33:09
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御风(远)

新虫 (初入文坛)

推荐一个酶:KAPA2G Fast HotStart DNA Polymerase(Use 1 sec extension per cycle for targets ≤1 kb, and 15 sec/kb for longer fragments, or to improve yields)
9楼2018-11-20 13:34:44
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