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农杆菌注射没有病斑
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导的烟草瞬时转化： A、 ?实验步骤： 1、 将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中，28℃，200rpm过夜。 *估算时间，防止农杆菌液浓度超过1OD，否则会影响转化效率。 2、当菌液OD值介于0.6~1.0之间时，1000g，5min离心收集沉淀 3、所得沉淀用1ml Induction medium 重悬。 728度放置2~3小时 4、测OD值，根据实验需要，配置侵染液（组合详见下文）。 5、 用不加针头的注射器将侵染液注射进6~8周大的本氏烟草叶片中。 ? B、试剂： Induction medium： MES-KOH ?PH 5.7?? ?10mM MgCl2???????????? ??10mM AS????????????????? 200uM 最终注射OD600为0.5左右，悬浮液是直接三个溶液配的混液后孵育了2-3h，并不是先孵育再加AS，目前已经第五天了，还是没有病斑，请各位大神指点。 发自小木虫Android客户端 |
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