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月下影相随

新虫 (初入文坛)

[交流] 原核表达 已有4人参与

求解答:我做的鳖的抗菌肽蛋白原核表达,我先用PMD-18T载体和我的基因成熟肽连接,然后把PMD-18T-成熟肽的重组质粒和PET-his质粒(Amp抗性)分别同时双酶切(HindIII 和 EcoRI),分别胶回收之后连接,然后导入E.coli DH5a正常生长,检测序列正确然后提取PET-his-成熟肽重组质粒导入到E.coli BL21(DE3),(未知重组质粒是否成功导入)E.coli BL21(DE3)在含有氨苄的LB平板上不长菌,(注:直接扩大导入重组质粒后的E.coli BL21(DE3)菌液细菌扩大培养,PCR检测我的成熟肽有条带,送测序检测说未检测到质粒),毕业论文很着急(这一步已经反复修改实验一个月了就是不成功),请各位大神帮解答,谢谢!
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
毒性蛋白吧,建议换个宿主细胞菌

发自小木虫Android客户端
2楼2018-10-08 23:25:41
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bio转录组

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
挑菌,提质粒-送测
生活活生生累死
3楼2018-10-09 08:29:02
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吴淑望

新虫 (初入文坛)

4楼2018-11-06 18:14:15
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6JJ6JJ

银虫 (正式写手)

5楼2020-11-10 21:50:20
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