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原核表达 已有4人参与
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| 求解答:我做的鳖的抗菌肽蛋白原核表达,我先用PMD-18T载体和我的基因成熟肽连接,然后把PMD-18T-成熟肽的重组质粒和PET-his质粒(Amp抗性)分别同时双酶切(HindIII 和 EcoRI),分别胶回收之后连接,然后导入E.coli DH5a正常生长,检测序列正确然后提取PET-his-成熟肽重组质粒导入到E.coli BL21(DE3),(未知重组质粒是否成功导入)E.coli BL21(DE3)在含有氨苄的LB平板上不长菌,(注:直接扩大导入重组质粒后的E.coli BL21(DE3)菌液细菌扩大培养,PCR检测我的成熟肽有条带,送测序检测说未检测到质粒),毕业论文很着急(这一步已经反复修改实验一个月了就是不成功),请各位大神帮解答,谢谢! |
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2楼2018-10-08 23:25:41
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