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17621933862

新虫 (小有名气)

[交流] 求助,克隆全长 已有1人参与

有一个问题请教,我只有ORF6这个基因的部分序列,我现在没有克隆出这个基因的全长,那我怎么设置引物做wester blot,这个引物设计,我看了不同的文章引物不太一样,有些是把全部编码区的序列跑出来,有些只拿编码区的一部分序列设计引物,我现在不知道怎么设置

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linhaobua

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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2楼2018-10-03 14:04:21
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17621933862

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by linhaobua at 2018-10-03 14:04:21
你好,首先引物的设计不是用于做wb的,其次,你是需要做什么物种的基因扩展

我的是鲫鱼,这个基因可能和疾病潜伏有关系,但是我想用这个基因做原核表达,可以的话做个多克隆抗体,想克隆出全长,从库里找到cds.在ORF里比对结果找不到他的起始密码子,由于片段比较大原计划进行片段克隆然后拼接全长,比对的结果告诉我找不到全长,所以拼接法克隆全长行不通,就想请教一下

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3楼2018-10-03 23:39:25
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