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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，克隆全长
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17621933862

新虫 (小有名气)

[交流] 求助，克隆全长 已有1人参与

有一个问题请教，我只有ORF6这个基因的部分序列，我现在没有克隆出这个基因的全长，那我怎么设置引物做wester blot，这个引物设计，我看了不同的文章引物不太一样，有些是把全部编码区的序列跑出来，有些只拿编码区的一部分序列设计引物，我现在不知道怎么设置

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1楼 2018-10-02 21:41:58
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linhaobua

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2018-10-03 14:04:21
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17621933862

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linhaobua at 2018-10-03 14:04:21
你好，首先引物的设计不是用于做wb的，其次，你是需要做什么物种的基因扩展

我的是鲫鱼，这个基因可能和疾病潜伏有关系，但是我想用这个基因做原核表达，可以的话做个多克隆抗体，想克隆出全长，从库里找到cds.在ORF里比对结果找不到他的起始密码子，由于片段比较大原计划进行片段克隆然后拼接全长，比对的结果告诉我找不到全长，所以拼接法克隆全长行不通，就想请教一下

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3楼2018-10-03 23:39:25
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