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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 过表达质粒转染
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包包大包子

新虫 (初入文坛)
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过表达质粒转染
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我构建了两个过表达质粒，用于细胞转染检测。测序结果证明载体构建成功。之后我买了天根无内毒素质粒大提试剂盒，质粒提取后转染细胞出现凋亡，我过表达的基因应该是促进细胞增殖抑制凋亡的，但转染后却出现死亡，找不到原因，而且转染空载体组也和转染过表达组一样出现凋亡，转染12h时观察细胞形态还没什么变化，24h时就已经出现凋亡。找不到其中的原因，希望大家能帮我分析下，谢谢。

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1楼 2018-10-01 00:42:32
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包包大包子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 谈大炮 at 2018-10-01 01:33:55
转染试剂呢，换换液试试

12h换液和24h时再换液，没区别还是凋亡

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11楼2018-10-01 01:37:42
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谈大炮

金虫 (著名写手)
转染试剂呢，换换液试试

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10楼2018-10-01 01:33:55
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hehelmd

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
重新换个转染试剂，或者降低试剂使用量，换液时间再提前，六小时应该差不多吧

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12楼2018-10-01 11:25:49
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包包大包子

新虫 (初入文坛)
转染试剂我用的lipo3000，我用这个做基因沉默对细胞也没有什么损伤的，所以可以基本排除转染试剂的问题

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13楼2018-10-01 12:27:57
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rohdy

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
6-8h换液会好很多

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14楼2018-10-01 12:32:30
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包包大包子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by rohdy at 2018-10-01 12:32:30
6-8h换液会好很多

那我试试看

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15楼2018-10-01 12:58:56
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换个提取试剂盒呢，考虑质粒提取时内毒素去除的不干净原因

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16楼2018-10-01 23:17:56
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包包大包子

新虫 (初入文坛)
我用的天根的，有推荐合适的吗

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17楼2018-10-01 23:53:05
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tzynew2楼
2018-10-01 00:42   回复  
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hdchina20103楼
2018-10-01 00:43   回复  
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盐津梅李4楼
2018-10-01 00:43   回复  
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zhulei03245楼
2018-10-01 00:43   回复  
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c5e5824636楼
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18k2175317楼
2018-10-01 00:44   回复  
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武鑫鑫8楼
2018-10-01 00:44   回复  
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czo7681679楼
2018-10-01 00:44   回复  
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