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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 无缝克隆
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Agonilb

新虫 (小有名气)

[交流] 无缝克隆 已有2人参与

大家好，麻烦大家处处主意，谢谢大家了。
用takara的in fusion做载体构建，不知道是不是因为加入同源臂后，引物太长的原因，扩不出来基因，我的片段2500多，用的takara的HS高保真酶。

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1楼 2018-09-27 19:40:05
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以先用taq酶扩增出来连到t载体上 测序后用高保真酶去扩

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做基因修饰的老菜鸡
2楼2018-09-27 23:46:11
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Agonilb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ken19860823 at 2018-09-27 23:46:11
你可以先用taq酶扩增出来连到t载体上 测序后用高保真酶去扩

好的，谢谢你

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3楼2018-09-28 00:07:46
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Agonilb

新虫 (小有名气)


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4楼2018-09-28 08:01:58
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Agonilb

新虫 (小有名气)


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5楼2018-09-28 11:21:36
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Agonilb

新虫 (小有名气)


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6楼2018-09-28 20:38:05
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得扩不出来主要是引物设计问题，可以搜搜CloneUFO 一步克隆重组酶的说明书看看，很详细
（这个试剂盒我师兄上学时自己做的）
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7楼2019-11-15 18:20:08
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)
https://www.docin.com/p-2251416859.html
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8楼2019-11-15 18:20:58
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