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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 构载体遇到的一些问题
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freud

新虫 (初入文坛)

[交流] 构载体遇到的一些问题 已有2人参与

为什么我做的对照里直接用线性载体和目的基因转化的卡那板上也长出了一大片菌落

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1楼 2018-09-26 09:34:15
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小狼93

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
渊博震天: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-09-26 11:10:55
是不是感受态不纯或者卡那霉素失效，建议重新制备感受态并使用新配的卡那霉素平板

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2楼2018-09-26 10:56:11
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freud

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 小狼93 at 2018-09-26 10:56:11
是不是感受态不纯或者卡那霉素失效，建议重新制备感受态并使用新配的卡那霉素平板

感受态是新制不久的，卡那霉素是新配的卡那板是重新倒的，这就很难受了

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3楼2018-09-26 11:51:02
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小狼93

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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3楼: Originally posted by freud at 2018-09-26 11:51:02
感受态是新制不久的，卡那霉素是新配的卡那板是重新倒的，这就很难受了
...

那会不会是酶切不充分，或者菌株本身具有卡那霉素抗性。我之前遇到过感受态细胞本身具有抗性的情况

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4楼2018-09-26 18:09:12
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freud

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小狼93 at 2018-09-26 18:09:12
那会不会是酶切不充分，或者菌株本身具有卡那霉素抗性。我之前遇到过感受态细胞本身具有抗性的情况
...

我试了一下我做的DH5α大肠杆菌感受态和另外买的感受态细胞直接涂卡那板，都长出了很多菌，买的长的更多，请问遇到这样的问题您之前是怎么解决的

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5楼2018-09-27 21:58:08
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守望者047

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
问题就出现在你的卡那板上，你去隔壁实验室借一块他们用着没问题的板，一用就知道了

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数往者顺，知来者逆！
6楼2018-09-28 00:57:20
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