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qing1802

[交流] 菌种保存的问题

我想请问下,一般讲菌种保存在4度和-20度的情况下,哪种温度下保存的菌株存活率高啊
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

长时间不用-20保存
但愿人长久
2楼2009-04-08 12:37:34
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蓝色基因

金虫 (正式写手)

长时间可以加10%-20%灭菌甘油于-70度保存。
3楼2009-04-08 13:21:47
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

看这里。。

20%灭菌甘油于-20度保存。

很简单嘛。事先配制500g/L浓度的甘油母液,灭菌后室温保存好。
LB培养基培养后,准备灭菌的EP管,取200 uL菌液跟200 uL甘油母液混合盖严。-20℃保存1-2年问题不大。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-04-08 13:54:09
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licongjun1979

金虫 (小有名气)

就存活率讲,肯定是4度高。但就菌种的性能而言就不一定,一般温度低较好
5楼2009-04-08 14:00:04
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mofatuzi

新虫 (小有名气)

长时间当然要保种了
6楼2009-04-08 14:13:50
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happyxwz

银虫 (小有名气)

30%甘油与菌种液1:1保存  -20度就行 存活力一般没问题
7楼2009-04-16 21:38:22
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message

铁虫 (初入文坛)

长时间的话用30%甘油-20°C保存
8楼2009-04-16 21:45:40
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zhaoy02007

银虫 (初入文坛)

楼上的说法不统一啊,有20%,也有30%。不知是各个实验室摸索中调整过的使用浓度。
细菌的冻存,一般要保证甘油的终浓度达到25左右,当然这个是可以浮动的。但25%是比较准确的。即配置50%的甘油,保存细菌时50%甘油和细菌按1:1的量,-20度长期保存,-70度常年保存。
进化中没有失败的物种基因中没有无用的序列生物中没有长久的永恒
9楼2009-04-16 22:49:14
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hulqi

金虫 (正式写手)

降温一定要注意,-40度是敏感区,降温要循序渐进,最好有程控降温仪。温度越低,保存时间越长,但复苏的时候需要转接的次数越多。我们这边菌种保藏长期保藏使用液氮,理论期无限。甘油的终浓度25%左右,要自己摸索,我们这边使用30%的。我就是搞菌种保藏的,有什么可以交流的可以加QQ:403317508
10楼2009-04-17 00:51:36
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