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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR阴性出条带
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含笑~

银虫 (正式写手)

[交流] PCR阴性出条带

P出了目的条带200kb 左右，阴性对照也出条带（marker之后是阴性对照）了，亮度比目的条带稍弱，最可能是什么问题呢？试剂和水全部换吗？
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1楼 2009-04-08 10:47:06
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allen8368

木虫 (正式写手)
一般来讲这种情况都是水或者某种试剂出现了污染
我碰到这种情况都是把能换的全部换掉 因为时间才最重要啊 有时间的话可以摸一摸到底是哪种试剂出现了问题 呵呵
不过如果是你稀释引物的水出现了问题也会出现这个情况
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慢慢的认识你，再慢慢的忘记你...........
2楼2009-04-08 11:06:43
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含笑~

银虫 (正式写手)

回复allen8368

谢谢你的回答！重新准备东西中,下午重P。PS：PCR混匀时常出现气泡，怎样避免呢？
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3楼2009-04-08 11:17:36
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sunjq81

银虫 (小有名气)
有时候枪也会被污染，
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4楼2009-04-08 12:13:22
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛
除非十分把握的试剂，其余全部重新开始
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但愿人长久
5楼2009-04-08 12:39:19
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amilie030312

金虫 (正式写手)
最惨的情况就是气溶胶已经污染了你们实验室，这种情况就是你全部都换掉了用清水做模板也会扩出结果，这种情况只能用去DNA污染的专用产品彻底弄下了，不过一般这种情况还是很少发生的，除非你们实验室这个基因已经做了几年了，而且实验人员也不注意才会发生。
不是这种情况的话就把所有能还的全部换了就好了，再记得把抢去下DNA污染。
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6楼2009-04-08 17:41:08
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大飞370

铜虫 (小有名气)
可以肯定的是你的某样东西污染了，全部重配吧，另外你要用的消耗品要彻底灭菌才行！！！！！！
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7楼2009-04-08 18:14:49
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luluwong

金虫 (初入文坛)
我曾经也出过这种问题，不过当时么找到原因，希望大家多多讨论以下可能性的原因~
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8楼2009-04-08 18:21:19
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含笑~

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2009-4-8 17:41:
最惨的情况就是气溶胶已经污染了你们实验室，这种情况就是你全部都换掉了用清水做模板也会扩出结果，这种情况只能用去DNA污染的专用产品彻底弄下了，不过一般这种情况还是很少发生的，除非你们实验室这个基因已经 ...

大家都是怎么保证枪无污染的，先用75%酒精擦拭，紫外30min OK吗？我们那个移液器的头好像可以卸下来灭的，有必要吗？
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9楼2009-04-08 19:27:31
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zlp322

铜虫 (初入文坛)
我经常水和阴性都拉出条带的，也是稍淡的条带。一直搞不清什么原因。
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10楼2009-04-08 20:11:00
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