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liujunjunp

木虫 (小有名气)

[交流] Western blotting blotting buffer

谁能解释下western blotting blotting buffer 中的Glycine,Tris ,还有Methanol产生作用的化学机制呀?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★
liujunjunp(金币+5,VIP+0):谢谢 4-8 15:36
转膜相当于也是电泳的过程~
这里的Glycine和Tris的作用也是和电泳一样的
形成一个电场嘛,具体看这个链接
http://tong.dxy.cn/article/9/11/14/8102.htm
而甲醛能够辅助蛋白与膜结合
2楼2009-04-08 11:46:33
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+5,VIP+0):积极分享奖 4-9 17:22
liujunjunp(金币+5,VIP+0):谢谢 4-10 13:44
关于western blotting buffer 就是一个缓冲液作用电解液和电泳一样,利于转膜的环境,然后给这个环境加一个电极;Glysine的作用和电泳时是一样,在酸碱性溶液ph值是不一样的,转膜的缓冲液是碱性的,这样glycine跑的比较慢,而cl-离子跑的快,可以对蛋白样品分离;而methanol浸泡膜的目的是为了活化膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合,做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-04-09 15:41:53
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