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cll1024

银虫 (小有名气)

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专业: 生命科学

[交流] PUCM-T载体

各位虫友们，你们好啊！本人现在又遇到了点小麻烦，希望有经验的高人给点指导啊：我在做载体连接转化时出现了问题，我的载体经单酶切后，琼脂糖电泳检测只有一条带，表明酶切效果还不错，载体经PCR产物纯化试剂盒纯化后做连接转化试验，连接的目的片段末尾已加A，且是经过切胶回收纯化的。将纯化后的载体和DNA进行连接转化，但长出的白斑挑了20个单菌落，经PCR检测（用通用引物M13进行检测），均为假阳性，电泳检测仅有引物二聚体条带；同时挑了5个蓝斑，PCR均出现250bp左右的片段，说明是载体自连的现象，那该如何分析白斑出现假阳性现象--如果不是载体自连的问题（因为通用引物没有扩出任何产物），还有什么原因会造成这种现象？
希望各位给点意见

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:19 ]

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