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stephen1102金虫 (正式写手)
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[求助]
请教莽草酸发酵液中小分子杂质的去除 已有1人参与
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| 目前正在做大肠杆菌发酵表达的莽草酸分离纯化，面临一个问题：发酵液中存在与莽草酸性质相似的杂质比较难以去除，这种杂质有如下性质：1）极易吸水、粘稠（①用乙醇反相结晶有絮状沉淀出现，沉淀真空干燥后拿出来后极易吸潮，粘成一团；②料液真空干燥喷雾干燥粘壁严重）；2）与莽草酸性质相似，水溶性极好，能够结合阴离子树脂，且会与莽草酸一起洗脱下来；3）在紫外210nm处没有吸光值，我们纯化后样品用HPLC 210nm紫外检测器检测，杂质峰少，但纯度低，因此确定该杂质在210nm处无吸光值；4）确定该类杂质为小分子杂质，我们的料液用250 分子量的纳滤膜过滤过，因此此类杂质应该不属于大分子多糖或蛋白类杂质；5）确定该杂质并非奎尼酸与脱氢莽草酸，我们用奎尼酸和脱氢莽草酸标准品对比验证过。请教一下做过莽草酸的前辈，帮我分析一下这类是什么杂质？该怎么去除？ |
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