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stephen1102

金虫 (正式写手)

[求助] 请教莽草酸发酵液中小分子杂质的去除 已有1人参与

目前正在做大肠杆菌发酵表达的莽草酸分离纯化,面临一个问题:发酵液中存在与莽草酸性质相似的杂质比较难以去除,这种杂质有如下性质:1)极易吸水、粘稠(①用乙醇反相结晶有絮状沉淀出现,沉淀真空干燥后拿出来后极易吸潮,粘成一团;②料液真空干燥喷雾干燥粘壁严重);2)与莽草酸性质相似,水溶性极好,能够结合阴离子树脂,且会与莽草酸一起洗脱下来;3)在紫外210nm处没有吸光值,我们纯化后样品用HPLC 210nm紫外检测器检测,杂质峰少,但纯度低,因此确定该杂质在210nm处无吸光值;4)确定该类杂质为小分子杂质,我们的料液用250 分子量的纳滤膜过滤过,因此此类杂质应该不属于大分子多糖或蛋白类杂质;5)确定该杂质并非奎尼酸与脱氢莽草酸,我们用奎尼酸和脱氢莽草酸标准品对比验证过。请教一下做过莽草酸的前辈,帮我分析一下这类是什么杂质?该怎么去除?
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爬山虎1234

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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stephen1102: 金币+5, 乙醇-水混合结晶这种杂质去不掉 2018-09-21 14:57:37
乙醇/水混合溶剂重结晶
2楼2018-09-21 11:27:07
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哼一首情歌

新虫 (初入文坛)

您好,我也是刚接触这个项目想了解下您的方向跟进度,沟通一下

发自小木虫IOS客户端
3楼2020-05-25 21:23:25
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