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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 求助，HACAT细胞的培养经验
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欣爷2018

新虫 (小有名气)

[求助] 求助，HACAT细胞的培养经验 已有1人参与

为什么，我养的HACAT细胞，一个中瓶传代两个中瓶，要长十多天才能长起来呢？另外HACAT细胞，消化多久，用没有EDTA的胰酶可以吗，传代过程中，不离心，直接把胰酶倒掉可以吗？一般消化到什么程度终止消化呢？

@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2018-09-14 10:58:30
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Jesseb

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
您好，我也是养的HaCaT细胞，我的细胞状态挺好基本上25cm培养瓶两三天就可以长满。但是HaCaT的消化时间比较长，贴壁很牢固，基本上快的5分钟左右，长一点的我试过15分钟都消不下来，只能放回去二次消化，传代时一般是消化得差不多，把胰酶吸走，再加血清培养基吹打。但我也有看过师兄师姐直接加血清培养基，不吸走胰酶培养，个人感觉其实吸不吸没什么影响，要是有影响得话，就换个液。
  消化时候基本上就是看到细胞像流沙一样，缓慢流动就可以吸走胰酶了。我没有用没有EDTA的胰酶消化，这个真的不清楚。我也在解决细胞消化时间过长这个问题，我看到有些人是用一次性细胞刮，刮下来的。经验之谈希望对有你帮助，写的比较乱，抱歉。
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2楼2018-09-14 13:14:17
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欣爷2018

新虫 (小有名气)
我现在细胞状态还没恢复，还是长的特别慢，你消化到细胞像流沙一样流动，那这样你吸走胰酶的同时，细胞也会被吸走，这样的话你是怎么办的？消化到像流沙一样，意思是，瓶子里的细胞，都不在贴壁了是吗，就死，让所有细胞飘起来为止吗？非常感谢你，能回复我的帖子，

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3楼2018-09-16 10:17:58
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欣爷2018

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jesseb at 2018-09-14 13:14:17
您好，我也是养的HaCaT细胞，我的细胞状态挺好基本上25cm培养瓶两三天就可以长满。但是HaCaT的消化时间比较长，贴壁很牢固，基本上快的5分钟左右，长一点的我试过15分钟都消不下来，只能放回去二次消化，传代时一般 ...

尴尬，有个错字，“就是”

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4楼2018-09-16 10:18:55
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judylau

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 欣爷2018 at 2018-09-16 10:17:58
我现在细胞状态还没恢复，还是长的特别慢，你消化到细胞像流沙一样流动，那这样你吸走胰酶的同时，细胞也会被吸走，这样的话你是怎么办的？消化到像流沙一样，意思是，瓶子里的细胞，都不在贴壁了是吗，就死，让所有 ...

你的细胞现在怎么样啊，我的一直状态不好，也是换液第二天就会出现死细胞，再差一点就是一层细胞从底部脱落，漂浮着

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5楼2019-05-21 18:57:37
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