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欣爷2018

新虫 (小有名气)

[求助] 求助,HACAT细胞的培养经验 已有1人参与

为什么,我养的HACAT细胞,一个中瓶传代两个中瓶,要长十多天才能长起来呢?另外HACAT细胞,消化多久,用没有EDTA的胰酶可以吗,传代过程中,不离心,直接把胰酶倒掉可以吗?一般消化到什么程度终止消化呢?

@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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Jesseb

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
您好,我也是养的HaCaT细胞,我的细胞状态挺好基本上25cm培养瓶两三天就可以长满。但是HaCaT的消化时间比较长,贴壁很牢固,基本上快的5分钟左右,长一点的我试过15分钟都消不下来,只能放回去二次消化,传代时一般是消化得差不多,把胰酶吸走,再加血清培养基吹打。但我也有看过师兄师姐直接加血清培养基,不吸走胰酶培养,个人感觉其实吸不吸没什么影响,要是有影响得话,就换个液。
  消化时候基本上就是看到细胞像流沙一样,缓慢流动就可以吸走胰酶了。我没有用没有EDTA的胰酶消化,这个真的不清楚。我也在解决细胞消化时间过长这个问题,我看到有些人是用一次性细胞刮,刮下来的。经验之谈希望对有你帮助,写的比较乱,抱歉。
2楼2018-09-14 13:14:17
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欣爷2018

新虫 (小有名气)

我现在细胞状态还没恢复,还是长的特别慢,你消化到细胞像流沙一样流动,那这样你吸走胰酶的同时,细胞也会被吸走,这样的话你是怎么办的?消化到像流沙一样,意思是,瓶子里的细胞,都不在贴壁了是吗,就死,让所有细胞飘起来为止吗?非常感谢你,能回复我的帖子,

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3楼2018-09-16 10:17:58
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欣爷2018

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Jesseb at 2018-09-14 13:14:17
您好,我也是养的HaCaT细胞,我的细胞状态挺好基本上25cm培养瓶两三天就可以长满。但是HaCaT的消化时间比较长,贴壁很牢固,基本上快的5分钟左右,长一点的我试过15分钟都消不下来,只能放回去二次消化,传代时一般 ...

尴尬,有个错字,“就是”

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4楼2018-09-16 10:18:55
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judylau

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 欣爷2018 at 2018-09-16 10:17:58
我现在细胞状态还没恢复,还是长的特别慢,你消化到细胞像流沙一样流动,那这样你吸走胰酶的同时,细胞也会被吸走,这样的话你是怎么办的?消化到像流沙一样,意思是,瓶子里的细胞,都不在贴壁了是吗,就死,让所有 ...

你的细胞现在怎么样啊,我的一直状态不好,也是换液第二天就会出现死细胞,再差一点就是一层细胞从底部脱落,漂浮着

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5楼2019-05-21 18:57:37
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