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肉嘟肉嘟嘟

新虫 (初入文坛)

[交流] 线虫RNA提取 已有4人参与

各位虫友都是如何提取线虫RNA的?求大佬支招。

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北京金百特

禁虫 (初入文坛)

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2楼2018-10-15 03:51:34
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ssd一级生

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Trizol试剂盒提取。先收集L4时期的线虫,一般2000条到1.5ml EP管中加500ul trizol匀浆(研磨)2min,研磨后再加500 ul trizol ,RT孵育30min,加200 ul氯仿,vortex 15s,RT孵育15min,4℃离心(12000g/15min).转移上层液相至新的1.5 ml EP管(不要吸到中间相),加500 ul 100%异丙醇,RT孵育10min ,RT离心(12000g/15min),移走上层液体,加1ml 75%的酒精清洗,上下颠倒几次即可,RT离心(7500g/5min),吸走酒精,空气中干燥。加15 ul ddH2O溶解。
整个过程中要注意RNA酶的污染。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2018-10-26 17:25:05
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章莹_2014

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by ssd一级生 at 2018-10-26 17:25:05
Trizol试剂盒提取。先收集L4时期的线虫,一般2000条到1.5ml EP管中加500ul trizol匀浆(研磨)2min,研磨后再加500 ul trizol ,RT孵育30min,加200 ul氯仿,vortex 15s,RT孵育15min,4℃离心(12000g/15min).转移 ...

请问楼主线虫提取rna时,OD值总是在1.6-1.7左右,总是找不出是哪里出了错,如果楼主有经验,能否提供点意见。
4楼2019-03-11 10:33:43
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爽爽爽子

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by ssd一级生 at 2018-10-26 17:25:05
Trizol试剂盒提取。先收集L4时期的线虫,一般2000条到1.5ml EP管中加500ul trizol匀浆(研磨)2min,研磨后再加500 ul trizol ,RT孵育30min,加200 ul氯仿,vortex 15s,RT孵育15min,4℃离心(12000g/15min).转移 ...

请问细胞破碎仪破碎可以不
5楼2023-06-29 22:23:37
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