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tigerking596

木虫 (小有名气)

[交流] 求毕赤酵母破壁方法

测胞内酶活,采用超声破碎:功率600W,超声5s,停5s,90次。之后11000转离心,为考察破壁情况,将破壁前后的菌体进行显微镜观察,发现破壁效果不理想,破壁前后细胞形态相差不大,细胞破碎率低,各位同行是否有更好的破壁方法?望指教!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:03 ]
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s19820911

金虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢
加点玻璃珠进去,时间稍微长点。
2楼2009-04-06 17:59:05
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


350784478(金币+1):谢谢
玻璃珠,震荡
3楼2009-04-06 19:20:26
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mike9181

银虫 (小有名气)

玻璃珠,震荡 0-4du
4楼2009-04-08 10:58:37
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mofatuzi

新虫 (小有名气)

做过的大侠,能不能给个具体步骤,我将来也要做这个
5楼2009-04-08 14:12:44
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wanghao2900

银虫 (小有名气)

超声破酵母效果不好,酵母个头大细胞壁又厚,建议用超声前可先用溶菌酶破细胞壁!
6楼2009-04-09 19:15:03
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

溶菌酶对酵母无效,应用蜗牛酶
7楼2009-04-09 20:09:11
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

收集到酵母细胞后,加上体积约为100ul的破璃珠,旋涡器上充分振荡即可,后面的步骤跟平常提DNA差不多,酚氯仿抽提,酒精沉淀等
8楼2009-04-09 20:52:18
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阳光-leaf

木虫 (正式写手)

我们实验室用的是反复冻融结合超声破壁的方法,效果不错,楼主可以试一下.
1分钟有60秒啊。我可以在这1分钟内做好多的事。
9楼2009-05-13 20:30:58
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ysywc

金虫 (小有名气)

溶壁酶,有卖的
10楼2010-03-10 10:34:42
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