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笑喷菇凉

新虫 (正式写手)

[交流] 紫杉醇标准曲线老是跑不好,感觉自己也太失败了吧

我这几天在用99%的紫杉醇药品跑高效液相(超穷买不起标准品),想着先用这个制备一下标准曲线看看。流动相甲醇乙睛和水,227nm,结果20min内老是在2分钟多一点出峰,关键是一系列储备液测的根本不成线性。我已经重复了好几次了,感觉好无奈。就是不知道为什么。求大神指点。

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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你的描述,基本上不懂色谱原理尤其是高效液相的使用经验缺乏。看了我的回复,认真做实验,我保证你做出漂亮的曲线数据。
1,精确称量样品质量,(分析天平别出问题),用容量瓶精确定容。
2,移液管精密量取供试品液体,进行系列浓度稀释,认真再认真。
3,调整液相有机相与水的比例,大幅度降低有机相比例,使样品出峰位置在10min左右。
4,每一针的进样量保持一致,这样峰面积跟浓度才会成正比。

以上4点,认真实验,排除机器设备故障,没有做不成的曲线。

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2楼2018-09-09 13:28:52
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笑喷菇凉

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiyannangxj at 2018-09-09 13:28:52
看你的描述,基本上不懂色谱原理尤其是高效液相的使用经验缺乏。看了我的回复,认真做实验,我保证你做出漂亮的曲线数据。
1,精确称量样品质量,(分析天平别出问题),用容量瓶精确定容。
2,移液管精密量取供试 ...

非常感谢

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3楼2018-09-09 16:25:03
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rohdy

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼上的回复已经很到位,楼主注意227接近末端吸收了,可能存在干扰,注意有没有杂质峰的重叠

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4楼2018-09-10 09:18:40
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