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求助基因敲除--融合PCR之同源臂融合相关问题 已有7人参与
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左臂片段aacgtttctgctgggacagttgttgtttggttttctagaatcttttgagaaagttgagcctgagttaccactacttctaggccttttgctaaagcttcttgttgtcttttttctccttgctctattccctctaacagagatttagaagcagaaatagaggtttgcaaatctttacgaagcttttgaacttcagcaccaatttcttcatttttagtttcatttagaatggaatcaatagatgataatgtatccgatgctgtattaagctgttgctgagcttttgtatcgttaagcgtaataagcacatctcctttttctacgctatcgcctactttaacatgaactttttccacaggaagggggagagatgttacaataggagcctgtttggcaggcttagctatgcctgatagctccattagccctgatatatcttgttcttttactttggctgtttgaatggggatggctgttttctcagtattatccgttgtaatttcttttggagcacaagcagctaaagtaagaatactggttattaaccataacttacgcatatgttcaccgccttgatgagtttatgtagtatctcttcataaataaatgaactcatatttaacgtgcgctctttttcaacttttataacgaaaagggaggaatattccttcagataagccaaattttacaggataacttcctttttaagaaaagaaaaataatttgttcaaaaagttgtcacgaatatttatcaagaacatgaaaccccttatgacgtttattcgtatattaggtgtggtaaaaaaaaagggaagcacaagaaaaattcgaaaaagtataccattaaggtcagatttgttgtataatactgatagagattctcaatttaaacttattttaaattagtatctattttaaataagtattatacaaactatgctatttttagtatacaaaaaagaaccgcttccatcatgtttgaagtgtttatgattttattccaa 右臂片段gaaacatatttctttctataaaaaaagtggcttaacaataagttaagccactttttttcgatttgtctttttttgattgacaataaatccaattgcaacgacaaatataacaagcagtgttggaacaatgtagagagttgacgaggagtgaaagaaaaaagcaagcttttcttcgtgggtgatcattttacctgctgtaaacgcaaggataccagaaccaacgtatacaagaaaagaaaattgctccatcaagtaaagaactattttgcttccccagacaataattggaactgaaacaagcaagccaatgacaacaaatgttaagtttccgtgtgcagctccagcgacagctagtacgttatcaagacccattacaatgtccgcaaaaacaatcgttttgatggccgcaaaaatggacacactagccttaatatgttgttgttcttcttcttggatcagtagcttaatggcaatgcttatgagcaaaataccaccagcgaactgtaaataagggatcgtaagcaaatagacagcaaccattgtcagaagaatgcgtactataatggcaaggcctgtaccaagtacaatcgctttattacgctgattttctggtaagttgcggcaagcaagagcaataacaatggcattatcgcctccaagtacaatgtcaatgccgataatcattaaaataatggtgagcgcttcaagttccaatttgacatcctcccatcttcattacctaaatatattcaaaaaagtctcaagcttgtctgttattttttaattgaagaaaaaaagtgatatgagagtcttctcaaacattttattttctttctgaggtattttgtcatacaatgaagatataatttaccgtagtaatgaatatctacagtgagagcagaagtttttagtaccgaagtcttccacttctattcaaagtcctttttgggaaactaatgttaagatttaaaaagggagagaggaagaaactttacgaaatcgtcgaacggcaggcgtgcaaacttggcgtaatcatggtcatagctgtttcc 求助各位大神，本人女研究生一枚，第一次做这方面的试验，我已将设计了好几对引物，均融合不上，我想把左臂和右臂融合起来，左F需要带酶切位点kpn I；左R需要带酶切位点bam HI，右F需要带酶切位点bam HI；右R左F需要带酶切位点kpn I。求大神帮忙设计引物以及左臂和右臂融合的pcr具体体系以及条件，小女子就此谢过  |
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