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没看懂楼主的意思，我举个例子吧，如从果皮中提取，先加入己预冷的0．05 mol／L的磷酸缓冲液(pH=7．0)和果皮重量5％的不溶性PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，在高速组织捣碎机上捣碎，用4层脱脂纱布过 滤。滤液在l5 000xg下离心20 min，上清液即为POD粗提液。向酶粗提液中边搅拌边加入固体硫酸铵至30％饱和度，15 000xg离心20min，弃沉淀。 继续向上清液中加入硫酸铵至80％饱和度，搅拌、静置l一2 h，然后于15 000×g离心20 min，弃上清液。沉淀用0．05 mol／L的磷酸缓冲液(pH 7．0)溶解， 并以同样的缓冲液透析2 d，透析液在50℃下加热20 min，10 000 X g离心20 min，弃沉淀取上清液，得到POD提取液。 |
2楼2009-04-05 10:19:46
jadesome
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