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frozenfox7

专家顾问 (正式写手)

[求助] 多目的基因检测,但PCR退火温度不同,是否需要重复做GAPDH?

目的基因A 退火温度55度
目的基因B 退火温度59度

管家基因最好退火温度在59度,但55也能p出来。

请问我定量PCR是否要在不同的温度各做一次GAPDH,比如55度的时候A+GAPDH,59度的时候B+GAPDH,然后分别比较比较?还是是否可以只做一次GAPDH在59的时候,然后用55度的A基因ct值,直接减去59度的时候GAPDH的Ct值进行比较?
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xiangyunch

金虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-31 08:19:04
用55°的话要验证扩增效率的,内参和目的基因可以分开进行,然后再联合分析

发自小木虫Android客户端
2楼2018-08-30 15:34:48
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frozenfox7

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangyunch at 2018-08-30 16:34:48
用55°的话要验证扩增效率的,内参和目的基因可以分开进行,然后再联合分析

谢谢回复。
3楼2018-08-30 21:26:07
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