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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 植物提取物做抑菌试验。请教一下用什么溶剂溶比较好？在线等
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Apple丶wx

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物提取物做抑菌试验。请教一下用什么溶剂溶比较好？在线等 已有1人参与

求助植物提取物用40%乙醇提取干燥的，现在想用它来做抑菌试验。发现水溶性不好，请教一下用什么溶剂溶比较好？在线等。请问多少浓度的DMSO或者丙酮对细菌的生长没有影响？？谢谢
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1楼 2018-08-28 23:56:36
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夜雨梦天涯

新虫 (正式写手)
★
小冀-: 金币+1, 鼓励回帖 2018-08-29 09:31:19
这个可以用DMSO和丙酮自己配几个浓度做抑菌实验，验证其对细菌生长有无影响及有影响时浓度为多少。确定没影响后即可用其溶解提取物再做其做抑菌实验！

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2楼2018-08-29 00:17:27
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Apple丶wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夜雨梦天涯 at 2018-08-29 00:17:27
这个可以用DMSO和丙酮自己配几个浓度做抑菌实验，验证其对细菌生长有无影响及有影响时浓度为多少。确定没影响后即可用其溶解提取物再做其做抑菌实验！

谢谢，但是就是想问下有没有原来做过这方面的工作，我是用96孔板做，24个小时，差不多每个小时都要测一次，如果这样考察浓度的话，有点尴尬

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3楼2018-08-29 08:34:39
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夜雨梦天涯

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Apple丶wx at 2018-08-29 08:34:39
谢谢，但是就是想问下有没有原来做过这方面的工作，我是用96孔板做，24个小时，差不多每个小时都要测一次，如果这样考察浓度的话，有点尴尬
...

不好意思，我理解错了，以为你是要做牛津杯固体培养抑菌那种。你是要把提取物添加到培养基中同时接菌培养，每隔一小时测OD值观察菌的生长浓度对吧。

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4楼2018-08-29 10:56:54
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Apple丶wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夜雨梦天涯 at 2018-08-29 10:56:54
不好意思，我理解错了，以为你是要做牛津杯固体培养抑菌那种。你是要把提取物添加到培养基中同时接菌培养，每隔一小时测OD值观察菌的生长浓度对吧。
...

是的是的，亲，所以想问下

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5楼2018-08-29 10:58:44
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夜雨梦天涯

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励一下 2018-08-29 14:34:56
引用回帖:
5楼: Originally posted by Apple丶wx at 2018-08-29 10:58:44
是的是的，亲，所以想问下
...

那你可以先把干燥的提取物先用DMSO或者丙酮或者其他溶剂溶解一下，看看哪个溶解度最好，然后溶解之后还要加培养基溶液(这时候可以设置不同的浓度混合)混合看提取物会不会析出。确定不会析出后，再用96孔板接菌培养。不坐平行的话，一个板可以设置四组浓度了吧(24×4)？要做平行的话你就多拿几个96孔板做几组就好了！最后要注意一下，有机溶剂都是有轻微毒性的，浓度高也会对96孔板有腐蚀作用！所以浓度不宜过高。具体浓度结合溶解提取物的情况自己设计一下。记得同时做添加空白溶剂的对照实验即可。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Apple丶wx
6楼2018-08-29 11:17:45
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Apple丶wx

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 夜雨梦天涯 at 2018-08-29 11:17:45
那你可以先把干燥的提取物先用DMSO或者丙酮或者其他溶剂溶解一下，看看哪个溶解度最好，然后溶解之后还要加培养基溶液(这时候可以设置不同的浓度混合)混合看提取物会不会析出。确定不会析出后，再用96孔板接菌培养 ...

谢谢，我试试

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7楼2018-08-29 13:13:07
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分离渣渣

新虫 (初入文坛)
先做溶剂对菌体生长的影响，用不加溶剂的蒸馏水作对照，得到不对菌体产生影响的最高浓度，至于提取物的溶解问题，可能用丙酮这些试试，或者用丙酮甲醇混合溶剂溶解，制成母液，然后在母液里面加少量吐温80，与溶剂混合，再加入水中，溶解的可能会更好呢

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8楼2018-09-23 22:41:42
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hzwuqihao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果用的是96孔板做的话，一般都是用二倍稀释法做的，很多做天然产物的单体化合物做MIC（最小抑制浓度）的时候才会用到，参考文献有很多很多，建议你去中国知网下载一下中国海洋大学那几个做海洋放线菌的博士论文就可以了，他们的实验步骤写的非常详细，希望对你有帮助。
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9楼2018-10-05 21:28:54
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